【摘 要】
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目的：核因子k-B配体受体致活剂(RANKL)通路是促进破骨细胞生成的重要通路,以RANKL通路为激活靶点可治疗包括骨质疏松在内的骨代谢疾病.本文将基于RANKL通路,研究天然药物提取物巴戟甲素(巴戟天β-D果呋喃双糖提取物)活性对于破骨细胞分化的影响及分子作用机制.方法：通过考察巴戟甲素在不同浓度(25、50、100、200、400、800μM)下对骨髓巨噬细胞(BMMs)诱导的破骨细胞(OCs
【机 构】
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广州中医药大学中医骨伤科学重点学科实验室;广州中医药大学第一附属医院关节骨科
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的：核因子k-B配体受体致活剂(RANKL)通路是促进破骨细胞生成的重要通路,以RANKL通路为激活靶点可治疗包括骨质疏松在内的骨代谢疾病.本文将基于RANKL通路,研究天然药物提取物巴戟甲素(巴戟天β-D果呋喃双糖提取物)活性对于破骨细胞分化的影响及分子作用机制.方法：通过考察巴戟甲素在不同浓度(25、50、100、200、400、800μM)下对骨髓巨噬细胞(BMMs)诱导的破骨细胞(OCs)培育系统进行干预,观察对于抑制BMMs诱导生成OCs的合适体外浓度,TRACP染色计数和MTS试验评估细胞体系中OCs的形成和生存影响；骨片吸收实验评价巴戟甲素对成熟OCs骨吸收功能的影响；RT-PCR检测巴戟甲素对RANKL诱导的BMMs相关基因Ctsk、NFATc1、TRAcP、Acp5、V-ATPase d2表达影响；荧光报告基因分析及Western blot实验检测巴戟甲素抑制RANKL诱导的NF-kB和NFAT的活性.结果：依据IC50原则,巴戟甲素合适体外浓度为200μM,并在100-800μM浓度时效果有显著差异(P＜0.05),可抑制BMMs诱导OCs生成；巴戟甲素对抑制BMMs分化成OCs非基于细胞毒性；通过骨片吸收实验发现巴戟甲素3天内能显著降低骨吸收面积(F=54.86,P＜0.01)和骨凹陷(F=28.37,P＜0.01)；巴戟甲素可抑制RANKL诱导的BMMs相关基因Ctsk、NFATc1、TRAcP、Acp5、V-ATPase d2表达影响(P＜0.015)；巴戟甲素可抑制RANKL诱导的NF-kB和NFAT的活性(P＜0.05).结论：巴戟甲素作为补肾强骨类中药巴戟天的有效提取物,具有抑制RANKL诱导NF-kB和NFAT通路OCs分化的潜质,可运用于骨质疏松等代谢性疾病的治疗中.
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