【摘 要】
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目的:检测Surf 10个家族成员在恶性疟红内期的转录表达模式.材料和方法:常规方法体外培养恶性疟原虫3D7A和3D7B株(实验株),及MS814A1和MS814A5株(野生株,来源:泰国).采用Percoll和5％ Sorbitol(山梨醇)同步化处理上述各培养原虫株后,每8小时收集样本,连续收集56小时.提取样本RNA进行反转录获取cDNA.采用实时定量RT-PCR (Real time RT
【机 构】
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中国医科大学基础医学院免疫学教研室 110001 长崎大学热带医学研究所原虫学分野 852-852
【出 处】
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第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议
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目的:检测Surf 10个家族成员在恶性疟红内期的转录表达模式.材料和方法:常规方法体外培养恶性疟原虫3D7A和3D7B株(实验株),及MS814A1和MS814A5株(野生株,来源:泰国).采用Percoll和5％ Sorbitol(山梨醇)同步化处理上述各培养原虫株后,每8小时收集样本,连续收集56小时.提取样本RNA进行反转录获取cDNA.采用实时定量RT-PCR (Real time RT-PCR)方法,以PfAMA1和丝氨酰-tRNA (seryl-tRNA)为内参,检测实验株(3D7A和3D7B)和野生株(MS814A1和MS814A5)原虫红内期各阶段surf家族各成员的转录表达模式和水平.结果:Surf的10个家族成员在环状体期(0～24h)均高水平转录表达;而在滋养体阶段(24～36h),此10个家族成员处于沉默状态;而各原虫株在晚期裂殖体阶段(40～48h)均只有Surf4.1高水平转录表达,其它Surf矿家族成员均处于沉默水平.结论:Surf基因的转录调控机制不同于已广泛深入研究的var多基因家族.Surf4.1是红内期晚期裂殖体阶段主要表达的surf家族成员,可能是参与红细胞入侵的重要原虫分子.
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