基因枪轰击和肌肉注射不同剂量PRRSV ORF5基因疫苗诱导仔猪细胞免疫的比较研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:douliangster
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)经基因枪和肌肉注射免疫对诱导仔猪产生细胞免疫应答的影响.方法:用pcDNA-PRRSV-ORF5经基因枪和肌注分别免疫两组仔猪,同时以空载质粒pcDNA为阴性对照,灭菌水为空白对照;采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对仔猪外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞百分含量变化和T淋巴细胞体外增殖能力进行检测.结果:基因枪轰击和肌肉注射两种不同方法免疫仔猪诱导的外周血T淋巴细胞的增殖反应和CD4+、CD8+淋巴细胞的百分含量显著(p<0.05)或极显著(p<0.01)高于对照组.基因枪轰击10μg和肌肉注射200μg对仔猪外周血淋巴细胞增殖反应、CD4+和CD8+百分含量的影响效果相当,差异不显著(p>0.05).结论:两种免疫方法均能诱导仔猪产生良好的细胞免疫反应,可作为PRRS较理想的免疫方法.
其他文献
精液的冷冻保存技术,是人工受精技术的一项重大革新,尤其牛粉液冷冻保存的成功为畜牧业带来了巨大的经济效益,而由于猪的精子对低温特别敏感,进行冷冻保存的技术难度较大,所以直到现在,猪精液冷冻保存技术的研究还在继续研究之中。本研究目的是采用细管法本试验采用细管冷冻法,以猪精子冻后活率、复苏率为试验指标,在冷冻液中分别添加海藻糖、维生素C、咖啡因进行冷冻保存,研究它们对猪精液冷冻保存效果的影响。
由于奶牛性控胶囊为中草药提取物溶液,PH值为2.5,为观察在使用中对发情后待配种子宫组织结构的影响,特作子宫组织切片形态学观察.子宫内膜均呈发情期组织结构特征,但药液作用部位明显表现为:1、药液作用部位子宫腺体呈明显分泌类型,表现为子宫腺体呈高度螺旋状並有弯曲、子宫腺增粗、腺腔扩大、腺上皮核深染、子宫腺体间有淋巴细胞浸润等变化,但未见血管网改变.2、药液作用附近部位组织变化同于作用部位,但程度较轻
本文为国内首次使用流式细胞仪对猪进行性别控制研究的报道.猪精液通过流式细胞仪进行X、Y精子分离,分离精子经过数小时保存后,用于陆川母猪输卵管授精,最后产出健康仔猪.试验结果如下:(1)首次(2005年10月14日)精子分离的纯度为:X88%、Y83%;活力为X35%、Y21%.第二次(2006年1月1 3日)纯度为:X70%,Y68%;活力为:X52%,Y36%.(2)本试验中母猪受孕率为25%(
本文系统地研究了绵羊卵母细胞成熟培养时间、6-DMAP激活时间以及改进的培养液对绵羊卵母细胞孤雌发育的影响.结果表明:卵母细胞成熟培养25h和26h激活组的囊胚率和孵化率显著高于成熟培养24h激活组;6-DMAP激活液作用2h,激活效果较好;培养液改进后,孤雌胚的囊胚率有上升趋势,但差异不显著.在本试验条件下,卵母细胞体外成熟培养25h后在6-DMAP中激活2h,利用改进后的培养液进行培养,能获得
本文采用RT-PCR的方法利用肝组织提取的总RNA制备猪胰岛素样生长因子Ⅰ(pIGF-Ⅰ)cDNA目的片断,与pMD-18T vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.联合应用PCR鉴定、a互补法、限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备实时荧光定量PCR(FQ-PCR)梯度浓度参考标准.结果表明:pIGF-Ⅰ cDNA目的片断成功制备并获得
鸭瘟病毒(DPV) Cha株弱毒皮下注射免疫20日龄樱桃谷鸭后,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对免疫鸭和同居鸭(第12h开始)第10min、30 min、60 min、90min及12h、24h、6d、9d、12d、21d、36d、60d的心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、回盲处、血液、气管、气管分泌液、食管及其分泌液、十二指肠、空肠、回肠、肓肠、直肠
将PCR扩增到的二氨基庚二酸脱羧酶基因克隆到多拷贝质粒pUB110的EcoRⅠ和BamHⅠ位点之间,得到一个4.9kb的重组质粒ply4.9,通过酶切分析证实PCR产物已克隆到重组质粒中.然后,重组质粒转化B.licheniformis 6104及其AEC抗性突变株610401,在完全培养基、基本培养基及基本培养基+赖氨酸中培养转化子,测定二氨基庚二酸脱羧酶活性和赖氨酸产量,结果在基本培养基中赖氨
采用已建立的双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌的定量PCR检测方法,对DPV弱毒滴鼻免疫雏鸭的消化道双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌进行定量检测.双歧杆菌的数量变化为:回肠各个时间段的含量与对照组相近;十二指肠、空肠、盲肠和直肠的含量变化与对照组相比呈一定的波动性,但无明显差异性;食道的含量总体分别比对照组的多10倍左右.芽孢杆菌的数量变化为:十二指肠和直肠的含量与对照组的相近;食道、空肠和回肠的含量变化与对照
利用本实验室建立的荧光定量PCR,检测DPV强毒经口服感染鸭及其相应的同居感染鸭呼吸道大肠杆菌/葡萄球菌/乳酸杆菌数量的动态变化,结果发现:同居鸭大肠杆菌显著高于对照(P<0.05);葡萄球菌显著低于对照(P<0.05)而同居鸭极显著高于对照(P<0.01);乳酸杆菌极显著高于对照(P<0.01),且同居鸭显著高于对照(P<0.05)
应用ERIC-PCR法对DPV强毒株经不同途径感染20日龄鸭十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠中细菌菌群的结构多样性和动态变化进行了检测.结果表明:对照鸭肠道内的菌群结构相对稳定,其中十二指肠和空肠的ERIC-PCR条带最少,盲肠最多.皮下感染24h和口服48h前,各肠段ERIC-PCR扩增条带没有明显变化;皮下感染48h盲肠、口服感染72h盲肠和回肠条带数量明显增加.皮下和口服及其同居感染鸭随着感