【摘 要】
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目的：随着微波技术的广泛应用，微波辐射引发的健康威胁备受关注.脑是微波辐射损伤最敏感的靶部位，而线粒体是最早累及的细胞器之一.本课题组前期研究建立了微波辐射致神经元线粒体损伤的模型，发现微波辐射后神经细胞中HIF-1α表达增加，其激活可改善线粒体功能.但微波辐射后HIF-1α影响线粒体功能的调控机制未明，作用靶点不清.Akt/mTOR通路是一条与HIF-1α蛋白表达和增强HIF-1稳定性密切相关的
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所 北京 100850
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目的：随着微波技术的广泛应用，微波辐射引发的健康威胁备受关注.脑是微波辐射损伤最敏感的靶部位，而线粒体是最早累及的细胞器之一.本课题组前期研究建立了微波辐射致神经元线粒体损伤的模型，发现微波辐射后神经细胞中HIF-1α表达增加，其激活可改善线粒体功能.但微波辐射后HIF-1α影响线粒体功能的调控机制未明，作用靶点不清.Akt/mTOR通路是一条与HIF-1α蛋白表达和增强HIF-1稳定性密切相关的信号途径.因此，研究Akt/mTOR通路对HIF-1α的调控在微波辐射致神经元线粒体损伤中的作用及靶点，将为深入研究微波辐射损伤机制和防治措施提供新靶标和思路.方法：采用30mW/cm2微波辐射NGF诱导的PC12细胞，辐射时间为6min.假辐射组置于辐射盒内和辐射台上，不予辐射.采用Real-time PCR、Western Blot和图像分析等技术检测HIF-1α的表达改变；采用Western Blot和图像分析等技术检测Akt通路的信号分子(Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR)的表达变化；通过LY294002干预Akt表达和Rapamycin干预mTOR表达，检测HIF-1α的表达改变；通过构建并转染HIF-1α过表达和沉默质粒，观察线粒体功能变化，检测线粒体呼吸链限速酶编码基因COX Ⅰ和Ⅳ-1、Ⅳ-2表达.
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