【摘 要】
：
目的：本课题组为探讨JNK信号通路在黏菌素诱导的神经细胞中的作用机制,方法：以PC12细胞为研究对象,分别运用抑制剂(SP600125,20μM)及活化剂(anisomycin,4μM)调节JNK在黏菌素诱导的PC12细胞中的活性后,给予125μg·mL-1黏菌素作用12h,运用Western blot、免疫荧光和Hoechst33258染色等方法检测细胞自噬和凋亡相关指标及形态学变化,以探讨JN
【机 构】
：
东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030;沈阳工学院生命工程学院,抚顺,113122 东北农
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会
论文部分内容阅读
目的：本课题组为探讨JNK信号通路在黏菌素诱导的神经细胞中的作用机制,
方法：以PC12细胞为研究对象,分别运用抑制剂(SP600125,20μM)及活化剂(anisomycin,4μM)调节JNK在黏菌素诱导的PC12细胞中的活性后,给予125μg·mL-1黏菌素作用12h,运用Western blot、免疫荧光和Hoechst33258染色等方法检测细胞自噬和凋亡相关指标及形态学变化,以探讨JNK信号通路与黏菌素诱导的细胞自噬的关系.
结果：结果显示,黏菌素可诱导PC12细胞中JNK的活化,同时伴有Bc12的活化,并且12h时间点表达量最高,Bax表达量增加开始于12h,并且呈现时间依赖性;SP600125预处理可使自噬相关基因和蛋白(Beclin1、和LC3)表达量显著降低(p＜0.01),p62表达量增加(p＜0.01);anisomycin预处理结果恰好相反,且出现细胞核固缩、偏移现象更加显著;JNK活化后,黏菌素诱导的PC12细胞自噬相关蛋白表达量增加,同时伴有Bc12的活化,并且在6h时间点时表达量最高;同时伴有Bax表达量的增加,凋亡相关蛋白(caspase3、PARP)活化开始于6h,并且呈现时间依赖性.
结论：通过对JNK信号通路在黏菌素诱导自噬机制的初探,发现JNK参与黏菌素诱导的自噬,JNK-Bc12-Bax信号通路调节黏菌素诱导的细胞自噬与凋亡,加速了黏菌素诱导的自噬,并提前了凋亡的发生.
其他文献
目的：试验旨在研究苦楝叶中杀蚊幼的主要活性成分.方法：以埃及伊蚊3日龄幼虫为试虫,采用活性追踪法、浸液法,对苦楝叶乙醇提取物中杀蚊幼活性成分进行分离和结构鉴定.浸液法毒杀活性测定结果表明,乙酸乙酯萃取相对埃及伊蚊3日龄幼虫24h处理的LC50为0.547mg/mL相比石油醚相(LC50:0.910mg/mL)、正丁醇相(LC50:0.992mg/mL)显示出较好的杀蚊幼活性;结果：结构鉴定结果表明
目的：探讨芩红乳房灌注剂的镇痛、抗炎作用及急性毒性作用,为该药的临床应用提供理论依据.方法：采用"扭体法"和"热板法"研究"芩红乳房灌注剂"的镇痛作用,二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验研究了该药的抗炎作用,通过急性毒性试验对其安全性进行评价,测出该药的最大给药量与最大耐受倍数.结果："芩红乳房灌注剂"高剂量组与中剂量组的扭体反应次数相比生理盐水组差异极显著(P＜0.01),镇痛作用效果呈剂量依赖性;"热板
目的：以PLGA为载体材料,头孢喹诺为模型药物,采用喷雾干燥法制备微球,并对其进行体外、体内质量评价.方法：称取适量PLGA溶于100mL二氯甲烷中,配成60g/L的PLGA溶液备用白微球.通过扫描电镜.称取适量硫酸头孢喹诺原料药加入PLGA溶液,搅拌均匀,使PLGA与原料药质量比为3∶1,待溶液搅拌均匀后进行喷雾干燥.喷雾干燥条件:喷嘴口径为0.7mm,入口温度50℃,出口温度:20℃,空气流量
目的：解决目前犬用药物溶解度分类方法中胃液体积的确定这一瓶颈,建立适合犬的药物溶解度分类方法.方法：采用核磁共振技术对犬进行腹部成像,应用Amira三维可视化处理软件对影像进行处理,得到12只体重在10kg左右的比格犬的胃液体积.其他影响犬用药物溶解度的因素通过查阅文献、书籍的方式对前人的研究进行汇总所得.结果：12只犬的平均胃液体积为24.02±0.59ml,这个结果在之前报道的6ml-35ml
目的：针对甘草颗粒制备过程中,甘草浸膏得率低、用水量大浓缩耗时耗热大、水浸渍产物甘草酸含量低杂质多,进一步研究甘草颗粒的提取和制备,获得甘草颗粒提取和制备的优化工艺.方法：在提取工艺优化试验中,以甘草酸铵含量和甘草浸膏得率为评价指标,通过L18(37)正交试验考察溶媒、溶媒用量、溶媒pH、提取时间、提取次数、干燥温度对甘草颗粒提取工艺的影响确定提取工艺参数;在颗粒制备试验中,以颗粒的形状、颜色及粒
生物药剂学分类系统(Biopharmaceutics classification system,BCS)是根据药物的水溶解度和肠渗透性对药物进行分类的一种科学框架或方法.目前,它已被学术、工业以及监管机构广泛接受.与人药市场相对较大的经济回报相比,兽医药物制剂的开发成本非常昂贵.将BCS原则纳入兽药产品的研发和应用,将对兽药市场的监管非常有益.然而,由于动物和人在生理学上的差异,使得BCS在动物
目的：用植物乳杆菌,枯草芽孢杆菌和酿酒酵母发酵豆粕,消除了豆粕中不利的抗营养因素,提高了动物对营养物消化,吸收和利用.方法：发酵条件通过菌株的筛选,混菌比例,同时单因素分析:初始含水量,发酵温度和发酵时间,确定出豆粕的最佳发酵工艺.结果：发酵最佳工艺:40％初始含水量、40℃最佳发酵温度和48小时的发酵时长.豆粕在最佳发酵条件下,36h内发酵产物的消化率增加.粗蛋白的含量增加了4.3％,蛋白溶解度
目的：喹赛多是一种新的喹噁啉类药物,具有良好的抗菌活性和促生长作用,在兽医临床具有良好的应用前景,但其溶解性差,限制了剂型的开发和临床应用.方法：本研究拟采用酸碱中和重结晶和高压均质技术相结合的纳米化技术进行制剂的研制,利用单因素变量法和正交试验对组方进行筛选优化和工艺优化.通过扫描电子显微镜和纳米粒度仪对纳米晶体的性质进行考察,并按照《中华人民共和国兽药典》2015版的相关要求进行质量标准评价.
目的：在课题组目的是研究p53蛋白对黏菌素诱导PC12细胞发生的自噬是否存在调节作用.方法：PC12细胞转染p53siRNA/p53过表达质粒,以沉默或过表达p53蛋白,并通过免疫荧光确定p53蛋白的亚细胞定位.将黏菌素作用于PC12细胞12h或24h,采用免疫印迹法检测细胞自噬和凋亡的相关蛋白表达量变化,结合形态学变化和一系列生化指标改变,分析并探讨p53基因沉默及过表达在黏菌素诱导自噬过程中的
在临床,一些革兰氏阴性细菌几乎对当前所有临床可用的抗生素耐药,仅对多黏菌素类抗生素有效,故多黏菌素己成为治疗这些细菌感染最佳选择[1].随着多黏菌素的人医临床使用的增多,多黏菌素耐药已渐渐出现,尽管这一概率目前相对较低,但已成为一个重要的公共卫生威胁因素.如何减缓人类这一重要的抗生素的使用寿命,已成为临床专家及科学家较为关注的科学问题.己有多个临床研究证实,黏菌素临床治疗剂量为亚临床治疗剂量,以及