【摘 要】
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西方饮食建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠模型,观察血清内毒素水平,肝脏早期生长反应因子-1(early growth response-1,Egr-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达及肠黏膜机械屏障变化情况,进而探讨布拉氏酵母菌干预后的影响,初步探讨该药物对NAFLD的
【出 处】
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2017中国医师协会消化医师分会年会
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西方饮食建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠模型,观察血清内毒素水平,肝脏早期生长反应因子-1(early growth response-1,Egr-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达及肠黏膜机械屏障变化情况,进而探讨布拉氏酵母菌干预后的影响,初步探讨该药物对NAFLD的疗效以及相关作用机制.
将30只6-8周龄的清洁级雄性C57BL/6小鼠适应性喂养1周后应用随机数字表将其随机分为正常对照组(CG,n=12)和模型组(MG,n=18).正常对照组给予正常对照饮食(AIN93M对照饲料+正常饮用水)喂养,模型组给予西方饮食(高脂饲料+高糖饮用水)喂养.于喂养的24周末随机处死各组6只小鼠,留取相应标本,并进行肝脏HE染色,病理改变证实NAFLD小鼠模型成功.自第25周起,将模型组剩余12只小鼠随机分为布拉氏酵母菌灌胃组(TB,n=6)和模型灌胃对照组(TD,n=6),继续西方饮食喂养.正常对照组剩余6只小鼠为正常灌胃对照组(NG,n=6),继续给予正常对照饮食.TB组给予布拉氏酵母菌(5.98×108CFU/kg/day)灌胃,TD组及NG组同时开始给予布拉氏酵母菌相应辅料果糖(284mg/kg/day)+乳糖(19mg/kg/day)溶于蒸馏水中灌胃,每日灌胃1次,共6周,6周后处死全部小鼠,留取标本进行相应检测.观察小鼠的毛色、行为、精神状态等情况,同时每周测定小鼠体重.处死小鼠后,观察肝脏及回肠的大体情况,并完整切除肝脏,留取末端回肠组织,称肝脏湿重;采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、门冬氨酸氨基转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)水平;采用鲎试剂法测定血清脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平;HE染色观察肝脏及末端回肠黏膜病理变化;透射电镜观察回肠组织超微结构的改变;采用Real-time Q-PCR(Real-time quantitation PCR)方法检测各组小鼠肝脏Egr-1、TNF-α及末端回肠组织中TNF-α、Occludin mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肝脏Egr-1、TNF-α及末端回肠组织中Occludin、TNF-α的蛋白表达情况.
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