【摘 要】
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目的：以SDS-PAGE纯化的虾类过敏原大量制备多克隆抗体.方法：以SDS-PAGE分离纯化虾类过敏原,切下并粉碎目的蛋白所在的凝胶带.将含有10 μg虾类过敏原蛋白的凝胶带与弗氏佐荆混匀后,免疫BALB/c小鼠.加强免疫4次后,腹腔注射S180细胞,待产生腹水后收集,以Western blot检测所获抗血清以及腹水的效价和特异性。结果：以虾类蛋白质抽提物总蛋白为靶抗原时,Western blot
【机 构】
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中国海洋大学,水产品安全实验室,青岛,266003 青岛市卫生监督所,青岛,266071
【出 处】
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第二届中国浙江学术节——食品安全监管与法制建设国际研讨会暨第二届中国食品研究生论坛
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目的：以SDS-PAGE纯化的虾类过敏原大量制备多克隆抗体.方法：以SDS-PAGE分离纯化虾类过敏原,切下并粉碎目的蛋白所在的凝胶带.将含有10 μg虾类过敏原蛋白的凝胶带与弗氏佐荆混匀后,免疫BALB/c小鼠.加强免疫4次后,腹腔注射S180细胞,待产生腹水后收集,以Western blot检测所获抗血清以及腹水的效价和特异性。结果：以虾类蛋白质抽提物总蛋白为靶抗原时,Western blot显示,所获抗血清和腹水仅识别1条分子量约36 000的蛋白带,将抗血清和腹水分别做1：2000稀释后,仍能清晰地显示目标抗原所在位置.结论：以聚丙烯酰胺凝胶条带为载体,用微量蛋白即可成功地制备大量多克隆抗体.
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