利用改良SOE-PCR技术克隆TuMV CDN1-VPg基因

来源 :中国园艺学会十字花科蔬菜分会第十三届学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:li_uwx
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芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是白菜生产中的三大病害之一.TuMV利用白菜的翻译起始因子(eIF(iso)4E)进行复制、翻译及增殖,TuMV株系间的差异在eIF(iso)4E与TuMV互作过程中产生显著影响,因此单点突变体的制备对于研究基因功能的表达至关重要.通过序列比对发现,TuMV C4/CDN1-VPg间存在5个差异氨基酸位点.本研究采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以TuMV C4-VPg基因序列为模板,定点突变核苷酸,获得TuMV CDN1-VPg基因的5个单突变体以及TuMV CDN1-VPg基因全长.该研究为进一步揭示白菜eIF(iso)4E基因与TuMV的互作机制奠定材料基础,同时也建立了一套高效、便捷、经济的DNA定点突变方法.
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