【摘 要】
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目的 研究体外冲击波对成骨细胞粘附、迁移的影响并揭示其具体的调节机制，为冲击波更好地应用于骨科临床提供理论支持.方法 通过Ⅱ型胶原酶消化法获取成骨细胞，经纯化、鉴定后随机分成对照组(Con)、冲击波组(SW)、对照+特异抑制剂(7种)组(CI)、冲击波+特异抑制剂(7种)组(SI)、对照+siRNA-Integrin组、冲击波+siRNA-Integrin组.经10KV(脉冲500次)能量的冲击波
【出 处】
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2014广东省医学会骨科联合学术大会
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目的 研究体外冲击波对成骨细胞粘附、迁移的影响并揭示其具体的调节机制，为冲击波更好地应用于骨科临床提供理论支持.方法 通过Ⅱ型胶原酶消化法获取成骨细胞，经纯化、鉴定后随机分成对照组(Con)、冲击波组(SW)、对照+特异抑制剂(7种)组(CI)、冲击波+特异抑制剂(7种)组(SI)、对照+siRNA-Integrin组、冲击波+siRNA-Integrin组.经10KV(脉冲500次)能量的冲击波处理对样品处理后，应用细胞粘附率测定、划痕愈合试验及Transwell试验、流式细胞术与Western blotting检测整合素α 5、β1亚基的表达、RT-PCR检测整合素α5、β 1亚基mRNA的表达、Western blotting检测信号通路蛋白β-catenin、Focal Adhesion Kinase(FAK)、Erk1/2的磷酸化表达改变等方法，对各组样品进行测定.结果 Ⅱ型胶原酶消化法联合差速贴壁法可获得高纯度的成骨细胞；确定实验中冲击波的最适宜能量为10KV(脉冲500次)；细胞粘附率测定显示SW组细胞明显高于对照组(P＜0.01)；SW组细胞迁移能力大于对照组(R0.01)；整合素α5、β 1亚基及其mRNA的表达均高于对照组(P＜0.01)；Erk1/2、β-catenin、FAK等信号通路蛋白磷酸化表达明显增加(P＜0.01).整合素α5、β1亚基表达、p--Erk1/2、p-β-catenin、p-FAK之间存在内在的时间规律.结论 适宜能量冲击波促进成骨细胞的粘附及迁移的主要机制是：直接上调成骨细胞整合素β1亚基的表达，介导β-catenin、Erk1/2蛋白活化以增加局部粘着斑激酶(FAK)的形成.
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