【摘 要】
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目的：研究白桦单菎对破骨细胞内NF-KB活性的影响,探讨白桦单菎治疗骨质疏松的分子机制.方法：1.体外培养破骨细胞前体细胞RAW264.7及BMMs,利用DMSO将白桦单菎稀释成0、1、5、10、20μM等多个浓度梯度处理细胞24h,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内NF-KB抑制蛋白P65及NF-KB的蛋白亚基IκBα的磷酸化水平；2.通过免疫荧光实验检测白桦单菎处理RAW
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的：研究白桦单菎对破骨细胞内NF-KB活性的影响,探讨白桦单菎治疗骨质疏松的分子机制.方法：1.体外培养破骨细胞前体细胞RAW264.7及BMMs,利用DMSO将白桦单菎稀释成0、1、5、10、20μM等多个浓度梯度处理细胞24h,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内NF-KB抑制蛋白P65及NF-KB的蛋白亚基IκBα的磷酸化水平；2.通过免疫荧光实验检测白桦单菎处理RAW264.7细胞24h后NF-KB在细胞内的定位,确定NF-KB的转录活性是否会受到白桦单菎的影响；3.通过NF-KB-Luc报告基因系统测定RAW264.7细胞内NF-KB对下游靶基因的转录激活能力；4.通过染色质免疫共沉淀实验(ChIP)检测NF-KB与其下游靶基因TRAP,ALP,MMP9的转录起始启动子区域DNA结合的能力；5.通过核质分离实验进一步验证白桦单菎是否能影响NF-KB在细胞内的定位.
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