论文部分内容阅读
肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)是一种具有多重效应的炎症因子,在调节急、慢性肝损伤过程中起着重要的作用。然而,TNF-α在急性肝损伤发生发展过程中的作用机制尚不明确。方法本研究针对缺氧的腹膜乳斑是否是胃癌干/祖细胞定植的理想肿瘤干细胞龛进行了探索。同时进一步探索通过HIF-1α介导缺氧微环境调节胃癌干/祖细胞生物学表型的作用机制。目的本文将探讨不同浓度的TNF-α在急性肝损伤中的作用及其机制。方法本研究采用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl-4)腹腔注射诱导大鼠急性肝损伤模型。诱导肝损伤前15min预先进行腹腔注射不同浓度的TNF-α抑制剂Enbrel调节大鼠体内TNF-α的水平,浓度分别为0、0.25、0.5、1、2、4、8mg/kg。CCl4诱导肝损伤24小时后,采用Elisa方法检测血清中TNF-α水平,对石蜡包埋的肝组织切片进行HF染色观察肝脏损伤程度,用Tunnel和Caspase3免疫组化染色检测肝细胞凋亡状况,并利用Western Blotting检测抗凋亡基因和NF-κB信号通路相关基因的表达。结果在急性肝损伤过程中,随着Enbrel的剂量逐渐增加,血清中TNF-α的浓度逐渐降低,同时AST和ALT的水平逐渐下降,当Enbrel的浓度增加到1mg/kg时,血清TNF-α浓度为25pg/mL,AST和ALT水平降到最低,肝损伤明显减轻,肝细胞凋亡数目显著减少;当Enbrel浓度超过1mg/kg时,随着Enbrel浓度的增加,AST和ALT水平反而逐渐增加,肝损伤加重,肝细胞凋亡也随之增多。进一步研究表明,在Enbrel剂量逐渐增大的过程中,NF-κB相关基因p-IκBα和NF-κB-p65以及抗凋亡基因Bcl-XL、FHC、XIAP和Bcl-2表达逐渐降低。结论 TNF-α与急性肝损伤关系密切:TNF-α是急性肝损伤所必需的炎症因子,适当降低TNF-α浓度能有效减弱肝损伤,保护肝组织,而当TNF-α浓度过低时,反而会加剧肝损伤。综上所述,我们的研究结果提示不同浓度TNF-α在急性肝损伤过程中发挥双重作用,其机制可能是通过NF-κB信号通路和抗凋亡相关基因的共同作用实现的。这一研究将为临床上治疗急性肝损伤提供一定的参考依据。