PCR检测基因枪轰击和肌肉注射不同剂量PRRSVORF5基因疫苗在BALB/c小鼠体内分布规律研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiushizhegehao
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将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击以及200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg和50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠胃、肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官.通过PCR检测基因疫苗在BALB/c小鼠体内的分布规律,结果表明:于免疫后3h在各免疫组所取的BALB/C小鼠的胃、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏、免疫部位肌肉和脑中均检测到PRRSVORF5基因疫苗;于免疫后120天在6μg基因枪轰击组BALB/c小鼠免疫部位肌肉中检测到PRRSVORF5基因疫苗;于免疫后150d在200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg肌肉注射组BALB/c小鼠免疫部位肌肉中检测到基因疫苗;基因疫苗在BALB/C小鼠免疫部位肌肉中存留时间表现出一定的剂量依赖性;猪白介素2(pcDNA-1L-2)能延长ORF5基因疫苗存留时间.
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猪繁殖-呼吸道综合征是近几年影响养猪业发展的几个重要疾病之一,如何快速、准确的诊断该病,对预防和控制本病具有重要意义.本文将根据PRRSV的病原特征、流行病学、临床症状和病理变化等,主要就国内外对PRRS抗原、抗体诊断技术的研究现状作一综述.
猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业发展的重要疫病之一.其快速,简便的诊断尤为重要.本文就病料中检测PRRSV的诊断方法进行了综述.
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株ATCCVR-2332保守区ORF6和ORF7的基因序列,设计一条37bp的寡核苷酸探,末端用生物素标记.该探针能特异性检测出PRRSV核酸.应用该探针对8头人工感染PRRSVSC-1的28日龄PRRSV抗体检测阴性的猪感染后不同时间体内PRRSV分布时行了研究.结果显示在感染后7天即可在肺脏,肺门淋巴结,胸腺,扁桃体,脾脏,肾脏,脑,肠检测到PRRS
根据GenBank收录的ATCCVR-2332株ORF6和ORF7基因序列,用Oligo软件设计一套引物和37bp的寡核苷酸探针.成功建立了能原位检测石蜡组织切片中猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸的方法.该引物能特异扩增PRRSV核酸,而对猪瘟病毒(HCV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪乙脑病毒(JEV)的核酸呈阴性反应.应用该方法检测PRRSVSC-1株人工感染28日
本研究目的是构建PRRS诊断DNA微阵列.试验研究了靶基因克隆和靶基因与探针制备方法、靶基因杂交特异性和不同靶基因与探针浓度对杂交信号的影响,确定了构建PRRS诊断DNA微阵列靶基因和其最佳点样浓度、杂交条件和结果判断标准,结果为:1)应用RT-PCR从C14-2分离株和欧洲疫苗VP046扩增并克隆获得美洲型重组质粒C14P9(基因号:AY775132)、PRRSPS9(基因号:AY775134)
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将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别用6μg基因枪轰击和200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg、50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间取免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑等组织器官,多聚甲醛固定,石蜡包埋.用根据ORF5基因序列设计的特异性生物素标记的寡核苷酸探针进行原位杂交,检测
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCCVR-2332)的ORF6及ORF7部分保守序列,设计合成一对特异引物,通过优化RT-PCR反应条件,建立了从血清中检测猪PRRSVRT-PCR诊断方法.利用该方法检测PRRSV感染猪经高滴度特异性免疫血清治疗后血清中病毒RNA,6周内PRRSVRNA检测均为阴性,表明高滴度特异性中和抗体完全终止了PRRSV感染猪体内病毒复制.
本文对细胞因子的检测及其在鸡病毒性免疫抑制病中的应用进行了研究。文章围绕细胞因子检测的意义、细胞因子检测方法、细胞因子检测技术的应用等进行了论述。