【摘 要】
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为了探究南极鱼(L.Dearborni)抗冻蛋白基因LD4的抗寒分子机制,我们在南极鱼L.Dearborni的Ⅲ型抗冻蛋白基因家族中克隆得到含有4个结构域的鱼类Ⅲ型抗冻蛋白基因LD4,并构建了不同的表达载体.利用转基因技术在斑马鱼体内、斑马鱼细胞、哺乳动物细胞和植物上分别进行功能验证.结果 表明,LD4能够提高动植物在寒冷环境下的抗寒能力.为进一步探究LD4的抗寒机制,利用免疫共沉淀(CO-IP)
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海201306
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为了探究南极鱼(L.Dearborni)抗冻蛋白基因LD4的抗寒分子机制,我们在南极鱼L.Dearborni的Ⅲ型抗冻蛋白基因家族中克隆得到含有4个结构域的鱼类Ⅲ型抗冻蛋白基因LD4,并构建了不同的表达载体.利用转基因技术在斑马鱼体内、斑马鱼细胞、哺乳动物细胞和植物上分别进行功能验证.结果 表明,LD4能够提高动植物在寒冷环境下的抗寒能力.为进一步探究LD4的抗寒机制,利用免疫共沉淀(CO-IP)技术和质谱(MS)技术发现在细胞中与LD4蛋白相互作用的蛋白为葡萄糖调节蛋白78 (GRP78),该蛋白作为一种分子伴侣在蛋白质的折叠和转运过程及内质网应激反应中发挥重要作用,这为我们揭示LD4的抗寒机制提供了有力证据.本项研究将拓展抗冻蛋白的生理学功能,为其在抗寒育种中的应用奠定理论基础.
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