籼稻恢复系花药培养愈伤组织诱导条件优化

来源 :广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Almzg_0
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  选育高产、优质、抗病性强的恢复系是水稻杂交育种技术中的重要环节,而花药培养能够较快速稳定性状,加快基因纯化速度,缩短育种进程.但是,籼稻花药培养愈伤组织诱导率仍普遍较低,平均为1%左右,限制了籼稻花药培养技术的应用.为此,我们对籼稻恢复系杂交组合(基因型)、取材时间、低温预处理时间和培养基组成等进行了条件优化,以建立适合于籼稻恢复系杂交组合F1花药培养的高效愈伤组织诱导体系,结果表明:①不同杂交组合(基因型)对籼稻花药培养愈伤组织诱导影响较大,其中选用的12个杂交组合F1代花药培养均能诱导愈伤组织,平均愈伤组织诱导率达5.2%,最高达到11.4%,最低0.8%;②取材时间对花药培养诱导愈伤组织具有决定性影响,植株生长处于孕穗末期,稻穗即将外露,颖花呈淡黄绿色,花药高度约为颖花1/2-2/3.取材时间过早(颖花偏白色)或过迟(颖花偏绿色)均难以诱导愈伤组织.③稻穗4-8度低温预处理(0,3,7,10天),发现低温预处理3天,可获得最高愈伤组织诱导率(>5%),时间过长(7天以上),愈伤组织诱导率明显下降,且外植体容易出现细菌污染,而未低温预处理时,愈伤组织诱导率也较低(<1%).④以N6为基本培养基,含1 mg/L KT(激动素)+2 mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)+3 mg/L NAA(萘乙酸),蔗糖5%,添加500 mg/L脯氨酸和400 mg/L乳清蛋白水解物,琼脂粉5.8%,pH 5.8,于26度暗培养可获得较高愈伤组织诱导率.通过条件优化,籼稻恢复系杂交组合F1花药培养愈伤组织诱导率可达5%以上,与粳稻的愈伤组织诱导率相近,有利于籼稻花药培养后续实验,如愈伤组织再分化形成绿苗,对籼稻种质改良具有重要意义.
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