延胡索酸还原菌对延胡索酸在反刍动物瘤胃内被还原生成琥珀酸并进一步生成丙酸具有极其重要的作用.本试验以4头装有永久瘘管的本地杂交阉公羊的瘤胃液为试验材料,研究了山羊瘤胃延胡索酸利用菌在体外传代过程中的变化规律.试验采用体外继代培养法对山羊瘤胃延胡索酸利用菌进行富集培养,利用PCR-DGGE法以及液相色谱分析法研究了延胡索酸利用菌菌群及其代谢产物在传代过程中的变化,利用引物8F/1510R建立的16S rRNA克隆库分析了山羊瘤胃延胡索酸利用菌菌群经7代培养后的结构组成.结果表明,山羊瘤胃微生物菌群在继代培养7代后仍能够降解延胡索酸二钠生成丙酸；PCR-DGGE分析结果表明,随继代培养代数的增加,细菌DGGE图谱上的条带数逐渐变少,一些条带消失,一部分一直存在且明显得到富集,继代培养5代后细菌条带数趋于稳定；提取第7代培养物总DNA进行16S rRNA克隆库分析结果表明,所获得的88个克隆中,6个克隆属于Fusobacterium varium(相似性＞97％),占克隆总数的6.82％；42个克隆属于Wolinella succinogenes(相似性＞97％),占克隆总数的47.73％；4个克隆属于Clostridium cochlearium(相似性＞97％),占克隆总数的4.55％；10个克隆属于Bacteroides pyogenes(相似性＞97％),占克隆总数的11.36％；8个克隆属于Agrobacterium tumefaciens(相似性＞97％),占克隆总数的9.09％；2个克隆属于Oribacterium sinus(相似性＜97％),占克隆总数的2.27％；3个克隆属于Clostridium subterminale(相似性＞97％),占克隆总数的3.41％；3个克隆属于Fusobacterium naviforme(相似性＜97％),占克隆总数的3.41％；10个克隆属于Clostridium hastiforme(相似性＞97％),占克隆总数的11.36％；系统进化树分析表明,本试验所获得的88个克隆分别属于Clostridiales、Fusobacteriales、Rhizobiales、Campylobacterales、Bacteroidales.结果提示,山羊瘤胃液中存在大量的延胡索酸利用菌,它们可能会参与瘤胃延胡索酸还原过程,添加延胡索酸可起到体外富集延胡索酸还原菌的作用.