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研究目的:肥胖是胰岛素抵抗的诱发因素之一,胰岛素抵抗表现为靶细胞细胞对胰岛素的敏感性降低,胰岛β细胞代偿性的分泌胰岛素,长期的过量分泌会引起胰岛的功能受损。胰岛素抵抗的机制非常复杂,近期研究发现摄食抑制因子(Nesfatin-1)不仅具有抑制进食,还有调节糖脂代谢作用,在胰岛也能分泌Nesfatin-1,可能通过AMPK/mTOR发挥作用,但其作用还不太清楚,本文通过高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗,研究肥胖、运动和饮食干预对胰岛素抵抗小鼠胰腺Nesfatin-1及其与AMPK/mTOR的关系,为揭示肥胖、运动和饮食干预改善胰岛素抵抗的作用机制提供实验依据。研究方法:雄性4周龄雄性C57BL/6小鼠80只,按体重分层随机分组,正常组(NC组,10只),正常饲料喂养;高脂组(HF组70只),高脂饲料喂养。10周后,剔除肥胖抵抗鼠,将HF组体重超过NC组体重20%的确定肥胖组,再将肥胖组分为7组:即肥胖对照组(HFC组)、肥胖饮食干预组(HFI)、肥胖运动干预组(HFE组)、肥胖运动饮食干预组(HFEI)、肥胖对照注射Nesfatin-1组(NHF组)、肥胖饮食干预注射Nesfatin-1组(HFIN组),肥胖运动干预注射Nesfatin-1组(HFEN组)。所有饮食干预组均给予HFC组的70%饮食量,运动组1-3周采用递增运动负荷,起始负荷跑速10米/分,运动时间20分钟,第3周末达到25米/分,运动时间90分钟,持续5周;各Nesfatin-1注射组,在8周运动干预结束前连续注射3天Nesfatin-1,每天注射一次Nesfatin-1(15μg/BW/d),其它对照组注射相同剂量的生理盐水,末次注射后12h取材。用ELISA测定血糖、血清甘油三酯及胰岛素水平,用Western Blot法和实时荧光定量PCR法测定胰腺Nesfatin-1、AMPK和m TOR的蛋白表达和mRNA表达水平。运用SPSS 19.0统计处理软件对数据进行分析,组间比较采用单因素方差分析,均数±标准差(s)表示实验结果。研究结果:1.与NC组相比,HFC组小鼠体重、血清甘油三酯、血糖和胰岛素浓度显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),胰腺中Nesfatin-1、AMPK/mTOR的基因与蛋白表达水平显著下降(P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05);外源性注射Nesfatin-1后,胰腺中AMPK/mTOR的基因及蛋白表达水平显著高于其对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05),血糖、血清甘油三脂和胰岛素水平亦显著下降(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。2.连续8周干预后,与HFC组相比,HFI、HFE和HFEI组小鼠体重、血清甘油三脂、血糖和血清胰岛素水平均显著下降(P<0.05,或P<0.01),胰腺中Nesfatin-1、AMPK及m TOR基因和蛋白表达极显著升高(P<0.05,或P<0.01)。外源性注射Nesfatin-1后,小鼠血脂、血糖和胰岛素水均显著低于各自的对照组(P<0.05或P<0.01),胰腺中Nesfatin-1、AMPK及m TOR基因和蛋白表达显著高于各自对照组(P<0.05或P<0.01);HFEI组部分指标好于HFE和HEI组。研究结论:1.高脂饮食可引起小鼠发生严重肥胖以及胰岛素抵抗,其产生机制可能与胰腺Nesfatin-1/AMPK/mTOR通路被抑制有关。2.饮食、运动以及饮食与运动联合干预均可显著改善小鼠肥胖和胰岛素抵抗,其机制可能与胰腺Nesfatin-1/AMPK/mTOR通路上调有关。运动饮食联合干预效果好于单一干预。