【摘 要】
：
本研究从我国不同地区的经MDV疫苗免疫后仍有肿瘤高发的鸡群中,分离到12个MDV野毒株.用抗REV的单抗做间接荧光抗体试验证明其中3株有REV的共感染.对其余没有REV的9株MDV感染细胞的基因组DNA做斑点分子杂交及PCR显示,有4株MDV基因组中已整合进REV的LTR序列.根据MDV基因组上易插入REV的LTR的高频位点的序列合成7条引物,根据REV的LTR合成4条引物,由此交叉组成28对引物
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究从我国不同地区的经MDV疫苗免疫后仍有肿瘤高发的鸡群中,分离到12个MDV野毒株.用抗REV的单抗做间接荧光抗体试验证明其中3株有REV的共感染.对其余没有REV的9株MDV感染细胞的基因组DNA做斑点分子杂交及PCR显示,有4株MDV基因组中已整合进REV的LTR序列.根据MDV基因组上易插入REV的LTR的高频位点的序列合成7条引物,根据REV的LTR合成4条引物,由此交叉组成28对引物,从广东和广西分离到GD0202和GX0101二个MDV野毒株扩增和克隆已整合进MDV的REV-LTR序列及其相连的MDV序列.测序证明,二株中的REV-LTR插入序列及在MDV基因组中短独特序列(US)上的插入位点完全相同.这表明,这二个毒株很可能是由同一次重组事件在鸡群中形成的流行毒株.将国内5个不同生产厂家来源的禽痘弱毒疫苗株和1株禽痘野毒株在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传5代,用禽网状内皮增生病病毒(REV)特异性的单克隆抗体,进行间接免疫荧光试验(IFA),均检测不到传染性REV.但是以这6株禽痘病毒(FPV)感染的第2代和第5代细胞基因组提取物为模板,通过PCR均能扩增出REV的长末端重复序列(LTR)和囊膜蛋白(env)基因片段.用特异性核酸探针作分子斑点杂交(Dot-blot),结果显示所扩增的PCR条带为特异的REV-LTR和REV-env基因片段.实验结果表明,我国的一些痘病毒疫苗和野毒株基因组中,已稳定地整合进了REV的基因组成分.这是国内外对从病鸡中分离和鉴定到整合有REV-LTR的重组MDV野毒株的首次报道,也是国内对禽痘病毒天然重组病毒的首次报道.本研究表明,今后应对不同病毒间的天然重组现象在病毒变异中的作用给予高度重视.
其他文献
根据已发表的番鸭呼肠孤病毒sigma C蛋白基因核酸序列设计引物,利用RT-PCR技术,扩增番鸭呼肠孤病毒MW9710株sigma C蛋白基因,经T/A克隆,插入到pMD18-T载体上,测序分析结果表明:MW9710株sigma C蛋白基因的开放阅读框为810nt、编码由269个氨基酸组成、分子量为29.4kDa的sigma C蛋白.经BLAST等分子生物学软件分析,其与法国MDRV89330株
本研究对影响NASBA检测H5亚型禽流感病毒的引物、离子浓度、反应温度等因素进行了试验,优化了反应体系,建立了NASBA技术.采用NASBA对禽流感病毒9株Hx亚型、1株H1、H3、H6亚型、3株H9亚型、5株不同宿主来源的新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、SPF鸡胚尿囊液及禽流感(H9)疫苗和其他禽类疫苗进行检测,结果NASBA(H5试剂)仅检测到禽流感病毒Hx亚型,表明该方法特异性强.采用已知
血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)人工感染25日龄樱桃谷商品肉鸭,皮下途径感染雏鸭的潜伏期(4h)比滴鼻途径的潜伏期(10h)短,但滴鼻途径感染雏鸭的死亡率(95.5﹪)比皮下途径感染的死亡率(63.6﹪)高.两种途径感染雏鸭的临床症状和病理变化相似,均出现了纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎等病理变化.发病和死亡鸭组织学特征为心脏发生出血水肿、心肌炎、心肌纤维溶解消失;肝脏出血,肝细胞发生颗凿变性和空泡
将共表达禽流感病毒(AIV)HA与NA基因的重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖,制备成冻干疫苗,经翅下刺种途径接种商品鸡,免疫3周后 用100LD的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)进行攻击.结果重组鸡痘病毒疫苗免疫鸡后诱导产生了高水平的HI抗体,能够完全抵抗H5N1亚型病毒的致死性攻击,对雏鸡禽流感母源抗体的消长
用禽流感H5N2亚型毒株接种10日龄SPF鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活后与优质矿物油佐剂混合乳化制成油乳剂灭活疫苗.抽取其中三批,接种28日龄非免疫鸡100只,4天后检测抗体,以后每隔1周或2周采血检测H5亚型HI抗体,并于抗体水平为2log2、4log2、6log2左右时攻毒,结果表明,免疫后4天即能检测出抗体,之后逐渐上升,至第5周抗体水平达到高峰且较稳定,然后缓慢下降,110天后抗体降至临界
重组鸡痘病毒vFV282活载体疫苗(vFV282活疫苗)免疫7日龄雏鸡,分别于免疫后7、14、21、28、35、42、49、56天时采血,测定其抗新城疫病毒(ND)、传染性法氏囊病毒(IBDV)和鸡痘病毒(FPV)的中和抗体水平.结果表明,鸡体在免疫后7天,抗体水平开始增加,到14天达到高峰,免疫后56天时仍保持较高水平.
将重组鸡痘病毒vFV282疫苗用生理盐水作10、10、10、10稀释,分别免疫7日龄鸡,于免疫后21天,分别用NDV、IBDV和FPV攻毒,除NDV攻毒在10组保护率为25﹪(4/10),其余各组均为100﹪(10/10)保护.表明该疫苗的最小免疫剂量≤10TCID/0.2ml.
近年来,我县、区农村专业户养鸡雏鸡肾传支流行一直比较严重,查本站禽病门诊室近三年(2001年元月至2003年底)门诊病例并进行分类统计,三年共计接诊43200余例,其中肾传支(单一感染和混合感染)1260例,约占接诊总病例数的2.9﹪,该病在我县、区不仅发病面积广泛,且发病鸡群发病率、死亡率都比较高,更为严重的是有些痊愈鸡群到产蛋高峰期产蛋率达不到最高水平.实际该病对养鸡业造成的危害仅次于非典型新
依据适合禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)生存与传播的温度条件,将气温作为禽流感传播的风险因子,建立禽流感传播的气温风险评估标准,以中国大陆各月平均气温数据为基础,利用地理信息系统(Geographical Information System,GIS)进行时间与空间分析,绘制禽流感传播的气温风险评估图,预测我国大陆地区禽流感传播的风险性,为研究禽流感的流行规律提供参
本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行HA基因序列测定和分析发现,HA基因的裂解位点有部分毒株比其他毒株少1了一个碱性氨基酸,其编码的可能糖基化位点有较大差异,除了有7个共有的糖基化位点以外,还有16个毒株在170位多了一个潜在的糖基化位点,DK/HuNYY/7004毒株在156多了一个糖基化位点,但是所有毒株的受体结合位点完全一致,而在受体结合部的两