转透明颤菌血红蛋白基因的甘蓝型油菜后代分析

来源 :中国作物学会油料作物专业委员会第七次会员代表大会暨学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shigoujushi
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  透明颤菌是在氧气贫瘠环境中生长的一种好氧菌,由其产生的透明颤菌血红蛋白(VHb)可以促进微生物细胞在贫氧条件下的生长和代谢产物的合成.本文通过农杆菌介导法将透明颤菌血红蛋白基因(Vgb)导入到甘蓝型油菜,研究转基因植株后代代谢产物和耐湿性的变化.以甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育系的恢复系R2为受体,共获得12株抗卡那霉素的T0代幼苗,用Vgb基因特异引物检测后确定其中2株为阳性苗.套袋自交后,PCR检测发现两个T1代群体中Vgb基因3∶1分离,表明Vgb基因以单拷贝的形式整合到油菜基因组中.T2代群体PCR检测后,获得13个Vgb位点纯合、不发生分离的株系,取其中两个含Vgb基因纯合株系和受体材料R2(对照)进行后续表型性状鉴定.室内幼苗淹水试验(正常发芽24h后暗培养24h,再分别水淹21h、24h和27h)中,转基因材料主根长度和根重均大于非转基因对照,但幼苗主茎长度小于对照.温室淹水试验(淹水14d后恢复正常供水)结果,转基因株系与对照相比,转基因株系显示出更强的恢复生长的能力.与对照材料相比,在淹水结束后的第11和第20d,转基因植株功能叶片的丙二醛含量和游离脯氨酸含量低于对照,但叶绿素含量属于对照,到恢复生长第20d时丙二醛含量和游离脯氨酸含量在转基因材料和对照材料之间的差异达极显著水平.可见,Vgb基因导入甘蓝型油菜后引起了一系列生理生化反应,增强了甘蓝型油菜的耐湿性.
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