水牛LPAAT基因的克隆与组织表达分析

来源 :第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hjy276756267
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溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)和磷脂酸(phosphatidic acid,PA)是参与细胞内信号转导以及脂质体合成的两种主要磷脂.LPA转化成PA的反应时磷脂合成的第二步反应,这步反应由溶血磷脂酸酰基转移酶(Lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAAT)所催化.LPAAT也叫做1-酰基甘油-3-磷酸-酰基转移酶(1-acyl snglycerol-3-phosphate acyltransferase,1-AGPAT),是三酰甘油(Triacylglycerol,TAG)组装过程的一个关键酶,它催化酰基从脂酰-CoA转移至LPA的sn-2位,产生的PA即可继续进行脱磷酸反应合成TAG,也可以进入磷脂合成途径,进而参与形成生物膜结构.本研究将应用LA-PCR、RT-PCR和RACE技术克隆LPAAT基因,经QRT-PCR技术检测LPAAT基因的组织表达情况,其中6对引物可以有效的扩增出LPAAT基因的DNA片段,采用DNAStar软件成功组装拼接了LPAAT基因序列.结果表明:LPAAT基因序列全长为7050个碱基,包含6个外显子和5个内含子,开发阅读框可编码287个氨基酸,其分子量为32.02 kDa,等电点为9.55.QRT-PCR检测结果表明,LPAAT基因在心、乳腺、胰腺和肾脏组织表现较高的表达.本研究只是探究LPAAT基因功能的开始,随后将开展该基因的多样性、功能获得与失活研究,旨在为分子标记技术辅助培育乳用水牛新品种和提高水牛产奶量奠定理论基础.
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