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目的研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)促进成骨细胞成熟矿化与初级纤毛及cAMP-PKA信号通路的关系。方法 1.免疫荧光染色观察体外培养大鼠成骨细胞(osteoblast,ROBs)的初级纤毛,并利用RNA干扰法抑制胞内IFT88表达,进而去除0B细胞的初级纤毛。1μM的ICA分别处理正常组与干扰组,24h后RT-PCR检测胞内collagenⅠ(COL I)、Runx-2基因表达量,Western blot检测胞内COLⅠ、Runx-2蛋白表达量;2.利用1μM的ICA处理正常ROBs细胞不同时间后,ELISA检测胞内cAMP的含量,免疫荧光法检测PKA催化亚基核转位情况,10μM腺苷酸环化酶(AC)抑制剂DDA和1μM PKA阻断剂KT5720分别抑制胞内AC和PKA活性后,1μM的ICA分别处理正常组与信号阻断组,24h后RT-PCR检测0胞内collagenⅠ(COLⅠ)、Runx-2基因表达量,Western blot检测胞内COLⅠ、Runx-2蛋白表达量;3.免疫荧光法检测何种CVLP信号通路蛋白定位于初级纤毛,并利用RNA干扰法抑制定位于初级纤毛中的蛋白后,1μM的ICA处理正常组与干扰组,24h后RT-PCR检测胞内COLⅠ、Runx-2基因表达量,Western blot检测胞内COLⅠ、RLnx-2蛋白表达量。结论 1.>70%的ROBs具有初级纤毛,RNA干扰法抑制IFT88表达后,>50%OB细胞的初级纤毛被去除,并且ICA促进ROBs细胞胞内COLⅠ、Runx-2表达的能力被显著抑制;2.ICA能够快速促进正常ROBs细胞内cAMP的含量,并时引起PKA催化亚基发生核转位。DDA和KT5720分别抑制胞内AC和PKA活性之后,ICA促进ROBs细胞成熟矿化的能力被抑制。3.免疫荧光定位法显示腺苷酸环化酶6(AC6)定位于初级纤毛中,RNA干扰去除AC6之后,ICA促进OB细胞COLⅠ、Runx-2表达的能力被显著抑制。结论淫羊藿苷促进成骨细胞成熟分化依赖于初级纤毛、cAMP-PKA信号通路及定位于纤毛中的AC6。