【摘 要】
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目的：本研究旨在构建并检测鸡输卵管组织特异性表达载体.方法：以鸡心提取的基因组DN为模板扩增出约3 kb的卵清蛋白调控序列50V；应用基因重组技术以50V部分启动序列50V-1.7k替换pIRES2-FGFP载体中CMV启动子,构建特异性表达载体50V-pIRES2-EGFP.用脂质体将50V-pIRES2-EGFP或pIRES2-EGFP转染至鸡输卵管上皮细胞中,检测启动子的特异性.结果：通过P
【机 构】
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Northeast Forestry University, the Academy of Life Sciences, Harbin 150040
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十七次学术研讨会
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目的：本研究旨在构建并检测鸡输卵管组织特异性表达载体.方法：以鸡心提取的基因组DN为模板扩增出约3 kb的卵清蛋白调控序列50V；应用基因重组技术以50V部分启动序列50V-1.7k替换pIRES2-FGFP载体中CMV启动子,构建特异性表达载体50V-pIRES2-EGFP.用脂质体将50V-pIRES2-EGFP或pIRES2-EGFP转染至鸡输卵管上皮细胞中,检测启动子的特异性.结果：通过PCR获得了卵清蛋白调控序列50V,并成功构建了50V-pIRES2-EGFP重组载体.在组织特异性载体50V-pIRES2-EGFP转染48 h的鸡输卵管上皮细胞中可以观察到绿色荧光的表达.上述结果表明,成功构建鸡输卵管上皮异性表达的载体,为进一步开展鸡输卵管特异表达外源蛋白的相关研究提供科学依据.
其他文献
目的：为了探讨G蛋白偶联受体30在小鼠MⅡ期卵母细胞及早期胚胎中的定位和表达.方法：分别运用免疫荧光组织化学技术和荧光实时定量PCR检测对GPR30及其mRNA在小鼠MⅡ期卵母细胞及早期胚胎的分布和表达.结果：GPR30在MⅡ期卵母细胞和早期胚胎的胞膜均有分布；在早期囊胚GPR30分布于其饲养外胚层(trophectoderm,TE)和内细胞团(inner cell mass,ICM),而在扩张囊
为了探讨卵泡刺激素是否可以通过影响腹腔肠系膜后神经节的活动从而调节雌性山羊的生殖活动,采用免疫组化SP法研究雌性山羊肠系膜后神经节中FSH受体的分布特点。结果显示：在肠系膜后神经节中,FSHR免疫阳性产物在雌性山羊肠系膜后神经节中分布广泛,神经细胞、支持细胞、施万细胞以及过路纤维中均有分布,但主要分布在神经细胞中；在神经细胞中,FSH受体免疫阳性产物主要存在于细胞膜和细胞质中,而细胞核中分布较少,
目的：本研究旨在检测GnRH受体(GnRHR)在山羊颈中神经节是否存在。方法：取雄性和雌性成年山羊的颈中神经节(middle cervical ganglion,MCG)各5对,经免疫组织化学SP法后,观察GnRHR在颈中神经节的分布特点。结果：在山羊颈中神经节的神经元、血管内皮细胞、神经纤维及卫星细胞均有不同程度的阳性染色。神经元中GnRHR强阳性产物分布于胞膜上,中等阳性产物分布于整个胞质中。
探究肠系膜后神经节是否对孕激素具有反应性。实验选取雌性山羊肠系膜后神经节，经免疫组织化学SP法，检测孕激素受体在肠系膜后神经节的表达及分布情况。孕激素受体阳性神经元在雌性山羊肠系膜后神经节广泛存在，强阳性产物存在于神经元胞核中，阳性产物存在于整个神经元胞体以及神经元核仁中。在神经节中神经纤维，微血管及毛细血管内皮细胞中也出现了阳性产物。在雌性山羊肠系膜后神经节中存在孕激素受体，说明肠系膜后神经节对
目的：探讨催产素是否可以影响雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的活动.方法：采用免疫组化SP法观察催产素受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布特点.结果：催产素受体在腹腔肠系膜前神经节分布广泛,节内的神经细胞、支持细胞和过路纤维均有OTR免疫阳性产物分布；OTR主要在神经细胞中表达,相对表达量与其他非神经结构相比差异性极显著(P＜0.01)；在神经细胞中,OTR免疫阳性产物主要存在于胞膜和胞质,核不着色.
以小鼠为参照对象，探索猪海马的成体神经发生、形态结构以及细胞构筑的特点。本试验以成体猪和成年小鼠的海马为研究对象，以双皮质素作为研究成体神经发生的特异标记物，结合其他几种标记物进行免疫组织化学和免疫荧光染色。经对比分析发现，双皮质素可以作为一种研究成体神经发生的特异标志物；成年猪与小鼠海马中持续地进行着神经发生，但两者具有不同特点，其中成年猪海马新生神经元的平均胞体面积比小鼠小，但其平均相对树突长
本研究采用甲苯胺蓝染色、免疫组织化学和透视电镜技术,以去卵巢大鼠为动物模型,研究了E2对海马组织结构和GFAP表达的影响.结果显示：(1)与NC组、SHAM组和OVX/ERT组比较,在OVX组,海马CA1-3区,齿状回神经元数量显著减少(P＜0.05),CA4区神经元数量减少不显著(P＞0.05)；海马CA1-4区,齿状回AC数量增加不显著(P＞0.05)；海马CA1-4区,齿状回,GFAP表达增
本试验利用免疫组化法研究松果体摘除后组胺在视网膜节细胞层的分布情况。结果显示，松果体摘除后，视网膜节细胞层组胺阳性细胞(组胺-RGCs)分布位置从视网膜周边区向中央区转移、细胞密度和胞体大小逐渐增加，且以中等大小细胞为主。结果表明，组胺-RGCs在视网膜节细胞层的分布受松果体调控，提示组胺-RGCs的表达与昼夜节律有关。
本研究旨在揭示单色光对鸡胚肝脏发育的影响.将36只AA肉鸡鸡胚随机分为4各组，即黑暗组、红光组、绿光组和蓝光组，光照度为15 lx.分别在胚胎期15(E15)、18(E18)和21天(E21)统计肝脏重量，检测肝脏组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化物酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)以及丙二醛(MDA)的含量.结果显示，在E18和E21绿光能够提高鸡
选用AA肉鸡受精卵90枚随机分为5组，试验组分别在绿、蓝、白、红LED灯下给予15 lx光照度24h连续光照至出壳，对照组为黑暗组，利用细胞培养法研究光色对鸡胚脾淋巴细胞增殖的影响.结果显示，脾淋巴细胞增殖率在15胚龄(E15)各组差异不显著(P＞0.05)，但绿光组最高；E18和E21绿光照射鸡胚脾淋巴细胞增殖率显著高于其他组，分别比其它光组高29.99％和34.51％(P＜0.05)，黑暗组最