【摘 要】
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目的 建立一种快速鉴别猪流行性腹泻病毒弱毒株与野毒株的方法。方法 基于新型的PCR后分析技术-高分辨率熔解曲线(HRM),大量分析PEDV 全基因序列的特点,建立鉴别PEDV CV77疫苗株与野毒株的PCR-HRM分析方法。在ORF1保守区域设计和筛选用于区分弱毒与野毒株的引物,同时用普通的RT-PCR方法进行对比。结果 能够很好的区分弱毒疫苗株与野毒参照株,特异性试验中其他非PEDV病毒无扩增；
【机 构】
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广东省实验动物重点实验室,广东,广州,510663 广东省实验动物监测所,广东,广州,510663
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目的 建立一种快速鉴别猪流行性腹泻病毒弱毒株与野毒株的方法。方法 基于新型的PCR后分析技术-高分辨率熔解曲线(HRM),大量分析PEDV 全基因序列的特点,建立鉴别PEDV CV77疫苗株与野毒株的PCR-HRM分析方法。在ORF1保守区域设计和筛选用于区分弱毒与野毒株的引物,同时用普通的RT-PCR方法进行对比。结果 能够很好的区分弱毒疫苗株与野毒参照株,特异性试验中其他非PEDV病毒无扩增；同时检测19份临床样品中,PCR-HRM方法检测均为阳性且鉴定为野毒株,普通RT-PCR后凝胶电泳分析检测18份阳性,为野毒株。结论 PCR-HRM方法具有特异性好,灵敏度高,PCR后无需开盖分析,极大的避免了污染问题,是一种新型的鉴别检测方法。
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