目的：通过生物活性检测结合化学指纹图谱分析，探索灯盏细辛抗血小板聚集的活性成分.方法：采用超高效液相色谱(UPLC)-紫外(UV)分析技术建立不同批次灯灯盏细辛药材化学指纹图谱，对不同批次灯盏细辛进行抗血小板聚集活性效价检测，基于谱效相关，推测可能的活性物质，并对5 个高相关性成分进行体外抗血小板聚集作用的验证，根据5 种单体化合物在灯盏细辛中的含量差异，计算5 个单体化合物的相对活性贡献度.结果：通过化学指纹图谱与抗血小板聚集生物效价进行谱效相关分析，筛选并鉴定出与生物活性相关系数大于0.5 的5 个色谱峰，分别为绿原酸、咖啡酸、野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸C.进一步体外实验表明五个化合物在相同质量浓度下均有不同程度的抗血板聚集作用(抑制率16.5％～85.5％)，相对活性强度顺序：野黄芩苷＞异绿原酸C＞咖啡酸＞异绿原酸B＞绿原酸；而5 种成分以相对活性贡献度来看，异绿原酸C 与野黄芩苷的活性贡献度大于另外3 种成分.结论：建立了灯盏细辛体外抗血小板聚集生物效价的检测方法 ；且野黄芩苷和异绿原酸C 是灯盏细辛体外抗血小板聚集的主要活性成分.