混合模式层析(Mixed-mode Chromatography,MMC)是一种新型生物分离方法,配基兼有多种功能基团,可实现蛋白的多模式结合,提高分离的选择性.色氨酸是唯一高特异结合于人血白蛋白(HSA)位点Ⅱ的天然氨基酸.本文针对HSA 分离,围绕色氨酸类似物,如L-色氨酸、色胺、N-乙酰-L-色氨酸、5-羟基-L-色氨酸和4-(1H-吲哚-2-基)苯胺)等,筛选MMC 配基,考察HSA 吸附性能,制备新型混合模式介质,用于HSA 高效分离.首先,制备系列色氨酸类似物为配基的MMC 介质,考察不同pH 对HSA吸附的影响,发现pH 影响较大.pH 5时,HSA 吸附容量最高,其中色胺介质和N-乙酰-L-色氨酸介质分别达到138.02 和132.05 mg/g；pH4 时,吸附容量显著下降.其次,考察不同盐浓度对HSA 吸附的影响,发现大部分介质具有一定的耐盐吸附特性,其中色胺介质表现最好,1.0 M NaCl 时HSA 吸附量仍有89.57mg/g.然后,以色胺为配基,通过控制基质活化和色胺添加量,得到系列不同配基密度的色胺介质.发现配基密度低于150 μmol/g 时,HSA 吸附量随配基密度升高而增大；高配基密度时,吸附量没有明显升高,表明中等配基密度有利于HSA 吸附.最后,采用色胺介质,从酵母发酵液中分离重组人血白蛋白,取得了良好分离效果.结果表明,以色胺为配基的新型MMC 介质具有良好的HSA 分离能力,具有较高的吸附容量,较好的耐盐特性,体现出良好的应用前景.