【摘 要】
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橘小实蝇(Bactrocera dorsalis)是一种重要的世界性果蔬害虫,也是一种重要柑橘害虫.肽聚糖识别蛋白(PGRP)在昆虫的先天免疫过程中发挥着对病原物识别的作用.本研究克隆到橘小实蝇PGRP-LC基因的4条可变剪切子,分别命名为BdPGRP-LCa、BdPGRPP-LCb、BdPGRP-LCc和BdPGRPP-LCd.通过实时荧光定量PCR仪对不同发育阶段和不同组织的时空表达模式分析,
【机 构】
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西南大学植物保护学院昆虫学及害虫控制工程重点实验室,重庆400716
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橘小实蝇(Bactrocera dorsalis)是一种重要的世界性果蔬害虫,也是一种重要柑橘害虫.肽聚糖识别蛋白(PGRP)在昆虫的先天免疫过程中发挥着对病原物识别的作用.本研究克隆到橘小实蝇PGRP-LC基因的4条可变剪切子,分别命名为BdPGRP-LCa、BdPGRPP-LCb、BdPGRP-LCc和BdPGRPP-LCd.通过实时荧光定量PCR仪对不同发育阶段和不同组织的时空表达模式分析,4条剪切子的表达量在变态过程中出现升高,尤其是BdPGRP-LCa和BdPGRP-LCc表达量有显著性的升高,另外结果显示中肠和脂肪体是其主要表达的组织.在E.coli、Beauveria bassiana、PGN-EB和PGN-SA的诱导试验中,检测4条剪切子对病原物的识别存在差异,4条剪切子都可以识别E.coli和PGN-EB；另外BdPGRP-LCa也可以识别Beauveria bassiana和PGN-SA；BdPGRP-LCb还可以识别Beauveria bassiana；BdPGRP-LCc可以识别PGN-SA.随后利用RNAi技术有效沉默BdPGRP-LCa、BdPGRP-LCc和BdPGRPP-LCd的表达量,在注射dsRNA 60h后注射E.coli,结果显示在前3天死亡率出现明显下降为35％～50％,对照组死亡率是18％,尤其是注射dsBdPGRPP-LCd处理组的死亡率接近50％.本研究的结果为今后从免疫方面防治橘小实蝇提供一定的分子基础.
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