【摘 要】
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运用PCR技术特异性地扩增了猪α干扰素(PoIFN)序列,得到501bp的扩增片段,然后按正确的阅读框架融合到巴斯德毕赤酵母(pichia pastoris)表达载体pPICZα C上的α因子信号肽编码序列3端,构建成重组表达质粒pPICZαC/PoIFN.经电击转化和Zeocin抗性筛选,得到含多拷贝IFN基因的酵母工程菌pichia pastoris X33/PoIFN,在φ=2.0％甲醇诱导
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广州,510642
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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运用PCR技术特异性地扩增了猪α干扰素(PoIFN)序列,得到501bp的扩增片段,然后按正确的阅读框架融合到巴斯德毕赤酵母(pichia pastoris)表达载体pPICZα C上的α因子信号肽编码序列3端,构建成重组表达质粒pPICZαC/PoIFN.经电击转化和Zeocin抗性筛选,得到含多拷贝IFN基因的酵母工程菌pichia pastoris X33/PoIFN,在φ=2.0％甲醇诱导下,以酵母培养液作SDS-PAGE及Western blotting,表明猪α-IFN基因在毕赤酵母中获得分泌表达.
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