RNA可视化原位杂交技术对感染细胞中猪瘟病毒RNA定位与分布的研究

来源 :2017猪瘟防控技术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuai000
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猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的猪的高度接触性、致死性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的法定传染病之一.致病机理的研究是从根本上控制疫病的途径之一,而病毒增殖中RNA的复制和蛋白的合成是CSFV致病机理研究的重要内容之一.因此在RNA水平上研究CSFV的感染及复制机制具有重要的科学价值.本文旨在建立一种新的可视化原位杂交方法,用于研究CSFV RNA在细胞内的定位和分布规律,对阐述CSFV的致病机理具有重要的理论指导依据.
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口腔液是哺乳动物口腔黏膜渗出液的混合物,能够反映出血液及口腔中的激素、药物、抗体、病毒等的含量,近年来,逐步被运用于许多猪病原体的抗原抗体检测.口腔液的采集,具有便捷、高效、安全、成本及技术要求低等优势,其以动物为主导,极大的减少了动物的应激反应,更真实的反映出动物机体的健康状况,同时符合当前动物福利的要求.本研究以浙江某规模猪场为例,以横截面模型,分别采集不同日龄阶段商品猪口腔液与和对应血清样本
猪瘟给世界养猪业带来了巨大的损失,尤其是在中国,虽然市场上有多种的疫苗存在,但是它们都不能给猪体提供有效的保护,需要研究出更加新颖而又有效的抑制猪瘟的策略.Mx蛋白是由α/β干扰素诱导宿主细胞产生先天性免疫的关键性抗病毒蛋白之一,属于发动蛋白超家族成员,具有很强的GTP酶活以及自装配倾向.Mx蛋白由N端GTP酶活区、中间域和C端酶活效应区构成,其中GTP酶活性区域是发挥功能的关键部分.人MxA(h
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猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起猪或野猪发病的急性传染病,临床上以全身败血症和白细胞减少的免疫抑制为主要特征.CSFV如何对宿主细胞的代谢进行调控,为自身复制提供充足的物质与能量的机制至今尚未完全阐明.本研究首次运用代谢组学技术证明了CSFV感染西藏小型猪后部分血浆代谢物浓度上调或下降,C
猪瘟兔化弱毒疫苗,国外称C株,是国际上公认的免疫效果最好的致弱活疫苗株.许多国家采用C株疫苗进行猪瘟的防控,根除了猪瘟.猪瘟野毒感染后,根据病毒毒力和宿主的免疫状况不同,感染后的临床症状会表现为急性、慢性或持续感染,感染后会导致出血,淋巴细胞减少症和免疫抑制等症状.而C株疫苗免疫后,没有任何临床症状和病理变化,疫苗病毒不会垂直传播,对怀孕母猪及其仔猪十分安全.虽然猪瘟疫苗问世已经半个多世纪,许多学
猪瘟是由猪瘟病毒引起的一类高度接触性、致死性传染病,严重危害全球养猪业.研究和了解猪瘟病毒的复制过程对揭示猪瘟病毒的致病机制起着至关重要的作用.随着RNA原位杂交技术的发展,在培养细胞或组织切片中可视化观察猪瘟病毒RNA的分布动态,对RNA水平上研究CSFV的感染及复制机制具有重要的科学价值.本文旨在建立一种新的可视化原位杂交方法,用于研究CSFV RNA在PK15细胞内的定位和分布规律,对阐述C
目前中国猪瘟的感染类型主要是亚急性感染及慢性感染,引起仔猪生长迟缓,免疫力低下,但因发病缓慢或不易察觉,给中国的养猪业带来巨大损失,造成这种感染类型的原因有可能是致病力较低的毒株感染.观察中等致病力病毒RNA、病毒蛋白在体内的分布情况可以为猪瘟病毒在体内的复制分布规律提供科学的理论基础.
猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)感染引起猪的一种烈性、高度接触性传染病,临床上以出血综合征与免疫抑制为主要特征.研究表明,CSFV可通过抑制宿主细胞凋亡实现持续感染,但其具体机制未得到阐明.线粒体在细胞抗病毒免疫应答中具有重要地位,线粒体活动(融合、分裂与交联)与细胞凋亡密切相关.本研究首次证
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猪瘟(CSF)是一种高度传染性、严重影响经济的重要病毒性传染病,宿主包括家猪和野猪.猪瘟病毒(CSFV)是单股正链RNA病毒,是黄病毒科瘟病毒属成员.根据遗传进化分析,CSFV分为3种基因型,含有高毒力,中等毒力和低毒力毒株.CSF的快速准确的诊断对于掌握猪瘟流行病学是非常重要的.为了开发用于快速检测的抗体,使用原核表达的NS3蛋白作为抗原免疫小鼠,获得4株CSFV NS3特异性单克隆抗体.间接免