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新城疫(Newcastle disease virus，ND)是一种能够感染多种鸟类的烈性传染病，尤其对鸡、鹅等常见家禽具有高度的传染性和致死性。目前，新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDv)只有一个血清型，而其诸多的基因型主要划分为两个大的谱系，即class I和classII。本实验分别以新城疫9a5b(class I)病毒和L0Sota(Class II)病毒基因组骨架为平台，插入绿色荧光蛋白(gteen uorescent protein，GFP)作为报告基因替代病毒的整个编码区，只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控区域Leadef和Tmiler，构建获得的微型基因组DNA片段反向插入反向遗传载体TVT(0．0)中，从而成功构建了两株病毒的微型基因组质粒。同时，将相应毒株的NP、P、L三个基因分别克隆进pcl-neo载体中，成功构建了三个辅助质粒的真核表达系统。通过将微型基因组和辅助质粒共转染BSRT7／5 T7-5细胞，我们发现在相同转染条件下，无论使用哪一种辅助质粒，Class II型微型基因组的报告基因的表达效率要远远高于class I型微型基因组。实验结果暗示class I NDV转录复制系统的运作效率要明显低于Class II NDV。