【摘 要】
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本试验旨在调查不同地域采集的不同菌种，对喹诺酮类药物(Quinolones)的耐药表型和质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD的分子流行情况，并对qnrD基因进行克隆，原核表达。2006～2009年从四川、河南等地分离到的大肠杆菌(141株)，沙门氏菌(31株)，肺炎克雷伯氏菌(46株)，肠球菌(50株)，奇异变形杆菌(20株)，共288株，采用微量稀释法测定试验菌株对环丙沙星(CIP)等四种喹诺酮类药
【机 构】
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四川大学生命科学学院,四川大学“动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室”,四川成都望江路29号 610064 四川农业大学动物医学院,雅安 625014
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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本试验旨在调查不同地域采集的不同菌种，对喹诺酮类药物(Quinolones)的耐药表型和质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrD的分子流行情况，并对qnrD基因进行克隆，原核表达。2006～2009年从四川、河南等地分离到的大肠杆菌(141株)，沙门氏菌(31株)，肺炎克雷伯氏菌(46株)，肠球菌(50株)，奇异变形杆菌(20株)，共288株，采用微量稀释法测定试验菌株对环丙沙星(CIP)等四种喹诺酮类药物的MIC值;运用PCR方法调查qnrD基因的流行、分布情况;将qnrD基因定向克隆到表达载体pET-30b(+)中，转化大肠杆菌感受态BL21(DE3)，经IPTG诱导阳性菌，通过SDS-PAGE检测qnrD基因的表达。试验菌株的总耐药率分别为：沙门氏菌(88.41％)，奇异变形杆菌(82.65％)，肺炎克雷伯氏菌(78.36％)，肠球菌(72.81％)，大肠杆菌(60.25％);qnrD基因的检出率分别为沙门氏菌(64.51％)，肠球菌(38.00％)，大肠杆菌(23.40％)，肺炎克雷伯氏菌(6.52％)，奇异变形杆菌(0％);SDS-PAGE分析表明，重组载体pET-qnrD可成功的在大肠杆菌中表达qnrD蛋白。本研究首次报道了qnrD基因在不同细菌中的流行情况，首次在肠球菌，大肠杆菌，肺炎克雷伯氏菌中发现了qnrD基因，对qnrD基因进行原核表达为后续试验提供了基础材料。
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