新生大鼠卵巢体外培养中NT3与LIF对始基卵泡发育影响的研究

来源 :2013年粤桂妇产科学学术交流会议暨2013年广东省医学会妇产科学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pentagon888
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  目的:探讨神经营养因子3(NT3)对启动始基卵泡发育的作用及其可能的作用机制,同时了解NT3和白血病抑制因子(LIF)在早期卵泡启动发育方面是否存在协同或叠加效应.方法:采用卵巢体外培养的方法,新生4天大鼠分别在基础培养基组、NT3组、LIF组、NT3+LIF组中培养14天.培养结束后,通过组织病理学、PCNA免疫组化评价早期卵泡的发育情况,TUNEL免疫组化评价卵泡存活,酶联免疫法检测培养基中激素水平评价卵巢的功能情况,以及通过RT-PCR检测卵巢组织中上皮生长因子(KL) mRNA的表达水平.结果:组织形态学显示基础培养组静息卵泡比例为60.52±5.22%,NT3组(40.66±7.4%)、LIF组(42.33±11.2%)、NT3+LIF组(40.76±5.27%)均较基础培养组显著减少;同时生长卵泡比例显著上升(NT3组59.04±7.38%、LIF组57.75±11.1%、NT3+LIF组58.7±4.94%),差异有统计学意义.PCNA阳性卵泡在新生大鼠卵巢占34.17±2.34%,基础培养基组(55.24±2.69%) PCNA表达量显著增加,NT3组(53.2±2.98%)、LIF组(54.91±2.69%)、NT3+LIF组(53.31±2.08%)增加更显著,与新鲜组、基础培养组比较的差异均有统计学意义.TUNEL免疫组化显示基础培养组间质凋亡指数为17.55±1.93%,NT3组(15.01±1.84%)、 LIF组(12.58±1.05%)、 NT3+LIF组(14.22±1.28%)均显著降低.ELISA检测示NT3组、LIF组培养液中的雄烯二酮水平在培养后期有升高趋势,以LIF组升高较为明显,但差异未达统计学意义;雌二醇水平在各个时间点上各组间无显著差异.NT3组培养后卵巢中KL mRNA的表达量显著增高,是对照组的3.38±0.43倍;而LIF组、NT3+LIF组分别为对照组的2.02±0.2倍、2.07±0.21倍,差异均有统计学意义.结论:NT3和LIF单独或结合均能维持卵泡存活、促进始基卵泡启动发育,但两者之间无明显协同或叠加效应.上调KL基因转录表达可能是NT3调控早期卵泡生长的作用机制之一.
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