拟核相关蛋白HU是猕猴桃溃疡病菌的致病相关因子

来源 :中国植物病理学会2021年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangtang4211
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细菌拟核相关蛋白(nucleoid-associated protein,NAP) HU具有类似真核生物组蛋白的特性,可不依赖序列结合dsDNA以及更强烈地结合有切口或弯曲的核酸结构,从而调控细菌染色体结构,参与DNA复制、重组、转座和修复,也可调控基因转录(如大肠杆菌gal操纵子)以及调控转录后翻译(如与rpoS的mRNA结合调控其翻译)。引起猕猴桃溃疡病的丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.acinidiae,Psa)具有4个HU同源蛋白,其中HU-beta可影响致病关键因子Ⅲ型分泌系统(T3SS)的表达。本研究构建了Psa的HU-beta敲除突变体,并基于敲除突变体构建了过表达回复菌株。通过接种猕猴桃枝条评价致病力发现,敲除突变体及过表达回复突变体的致病力均显著降低,且过表达菌株的致病力几乎完全丧失;通过梯度注射非寄主本氏烟的叶片,发现敲除突变体及过表达回复突变体激发过敏性坏死(HR)的能力均显著降低。RNA-seq结果表明,敲除突变体的T3SS表达量上升,而过表达回复菌株的T3SS表达量下降;同时也通过检测荧光素酶标记蛋白HrpA::nanoLuc的积累验证了转录组数据。但是,也有部分基因在敲除突变体与过表达回复突变体中表达趋势一致,例如,T2SS相关基因均显著降低;与DNA复制、重组和修复相关的基因均显著上调。此外,通过生物检测发现,敲除突变体及过表达回复突变体的运动性和脂多糖形成能力均显著降低,且过表达株下降更多。以上结果表明,HU-beta的精确表达与Psa致病密切相关,一方面可能与特异性调控T3SS有一定关系,另一方面更多地与HU-beta不平衡表达导致的变化趋势一致的生物学通路相关(如T2SS)。
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