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黄曲霉毒素B1(AFB1)是一种具有遗传毒性、免疫毒性、致癌性及抑制生长作用的真菌次级代谢产物,且在全球范围内污染严重。近年来,脱除粮食饲料中的AFB1成为各国学者们的研究热点。蒙脱石作为国家饲料添加剂目录中允许添加的饲料添加剂,虽然可在动物胃肠道中有效吸附AFB1,但是对AFB1并不具有靶向性且在排出动物体外后AFB1仍会污染环境。本文以实验室从酿造酱油酱醅中筛选获得对AFB1具有一定降解效果的菌株FS-Z1作为出发菌株,诱变筛选能够有效脱除AFB1的新型黑曲霉,并利用蒙脱石将其固定化,结合动物实验评价其脱除效果及安全性。通过紫外照射及酪蛋白培养基进行初筛和复筛,成功筛选出对AFB1脱除率较高的FS-UV1,并经测序及鉴定证明其为黑曲霉,脱除率较原菌株提高了34.1%,并对其脱毒作用进行研究,发现FS-UV1孢子悬液对AFB1无脱除效果,而菌丝体对AFB1具有吸附作用,发酵液则对AFB1具有降解作用,其中发挥降解作用的可能是蛋白质。FS-UV1在马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)发酵过程中,蛋白含量在发酵后48 h达到最大值10.07 g/L,将发酵48 h后FS-UV1发酵液经过透析、超滤得到活性蛋白,冷冻干燥后得到固体粉末。利用SDS-PAGE电泳对其组分进行分析,发现分子量分别为59KDa、21 KDa、16 KDa的三条条带;利用LC-q-TOF-MS对FS-UV1降解AFB1产物J1、J2、J3、J4、J5进行了初步结构推测。Ames试验对FS-UV1发酵产物及其AFB1降解产物致突变性进行了研究,试验结果表明发酵液及其AFB1降解产物并无致突变性,可进行体内动物实验。对购买自无锡宜兴的矿石进行XRD(X射线衍射)、SEM(扫描电镜)、FTIR(红外光谱)表征,实验结果证明矿石中蒙脱石含量达到87.6%。利用改性HSCAS在p H为10、温度为40℃、含量0.1%(w:v)条件下制备固定化FS-UV1。比较固定化FS-UV1与自由细胞对AFB1的脱除率,发现二者变化趋势基本相同,但固定化FS-UV1对AFB1的脱除率高于自由细胞。将固定化FS-UV1应用于脱除四个不同省份棉籽粕中的AFB1(含量分别为中1.18、0.65、0.89、0.0829 mg/L),FS-UV1在脱除时间为2 h时,对样品的吸附率达到93.46%~96.82%。模拟胃肠道体外试验表明:在模拟胃液与模拟肠液中脱除2 h时,固定化FS-UV1对AFB1的脱除率已达到了86.61%,且脱除率几乎不受到模拟胃肠液p H的影响。通过体内试验评价,对SD雄性、雌性大鼠的血液指标、生化指标、体重变化、平均日采食量、肝肾组织切片的变化等研究固定化FS-UV1对AFB1的大鼠饲料的解毒效果。结果显示:在AFB1含量为2.5 mg/kg的大鼠饲料中添加固定化FS-UV1可缓解AFB1带来的不良影响;并且单独饲喂添加固定化FS-UV1的饲料时,大鼠无不良反应。