水稻条纹病毒NS3蛋白与水稻GAPDH间的互作

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水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)NS3蛋白为病毒的沉默抑制子。利用酵母双杂交技术,从水稻cDNA文库中筛选出一个与RSV NS3蛋白互作的基因片段,该基因的推测功能是编码水稻3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)。RT-PCR扩增了水稻GAPDH基因全长,并构建至酵母表达载体pGADT7,酵母双杂交结果表明水稻全长GAPDH蛋白也能与NS3互作。细胞定位研究表明,GAPDH-GFP融合蛋白在本氏烟表皮细胞细胞质中大量积累,NS3-GFP融合蛋白定位于细胞质和细胞核中,但大部分定位于细胞核。双分子荧光互补实验进一步验证了NS3与GAPDH间存在互作,且互作主要发生在细胞核。
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