为扩大‘突尼斯软子’石榴适栽地区,解决‘突尼斯软子’石榴不耐寒的问题,本研究以该品种一年生扦插苗枝条为试材,通过比较在不同低温（-6℃、-9℃、-12℃）条件下不同低温持续时间的处理下的相对电导率、MDA、可溶性糖、可溶性蛋白、O^2-、过氧化氢、脯氨酸、CAT、SOD、POD等生理指标的变化,且进行恢复生长观察;并通过克隆石榴PgCBF2基因,进行生物信息学分析,构建超量表达载体转化拟南芥验证基因功能,以期为石榴抗寒研究和利用基因工程手段进行石榴抗寒新种质培育奠定基础。主要研究结果如下:1. 不同低温条件下‘突尼斯软子’石榴枝条耐寒性研究:（1）随着胁迫时间的延长,各温度下电导率、MDA、可溶性蛋白、可溶性糖含量均呈上升趋势,而CAT、POD、SOD、Pro、H₂O₂含量均呈先升高后下降的趋势。（2）根据各个生理指标反映的情况综合来看,‘突尼斯软子’石榴能够忍耐低温的时间随着温度的降低呈现降低的趋势,其在-6℃下能够忍耐54 h的胁迫时间,-9℃下能忍耐24 h,-12℃下能忍耐12 h。（3）根据枝条冻后恢复率的统计数值可以看出,‘突尼斯软子’石榴在-6℃下54 h仍维持成活率,在-9℃下最多忍耐24 h,在-12℃下超过12 h就不能成活。（4）根据研究结果,建议最低温度达到-12℃的地区不进行种植或采取抗寒保护栽培措施,防止‘突尼斯软子’石榴的冻害发生,影响经济效益。2. PgCBF2基因克隆及功能分析（1）根据拟南芥AtCBF2在NCBIBLAST找到石榴的参考序列信息,成功克隆并命名为PgCBF2。开放阅读框长699 bp,编码232个氨基酸,不含内含子,蛋白质分子质量为25473.35k Da,理论等电点为5.09,为亲水性蛋白。序列保守区域分析发现含有AP2特征结构域。进化树分析结果显示,PgCBF2所有同源蛋白都属于CBF家族。亚细胞定位预测结果显示该基因在细胞核表达。（2）对其枝条韧皮部进行低温处理后通过RT-PCR分析,得出PgCBF2基因受低温诱导表达。（3）成功构建35S:PgCBF2过表达载体,并转入野生型拟南芥中,成功得到3株过表达PgCBF2拟南芥植株,后续研究正在进行中。