从34株苏云金芽孢杆菌中筛选到一株产耐热蛋白酶菌株FZ62。首先，通过单因素筛选初步优化发酵培养基配方，确定最佳氮源为酵母粉，碳源为葡萄糖；其次，采用二水平Plackett-Burman设计对影响产酶的因素进行考察，从中筛选出有显著效应的3个因素：酵母粉、葡萄糖和初始pH值；再次，运用响应面分析法对该三因素进行三水平优化，获得它们的最优组合，发酵培养基最佳配方（g／L）：酵母粉20.4，葡萄糖1.0，KH₂PO₄ 2.5，MgSO₄·7H₂O 0.35，CaCO₃ 0.5，初始pH值7.07。优化后产酶水平从263.43 U／mL提高到1112.39 U／mL，实测值与响应面预测值仅为＋5.66％的误差。最后，发酵条件优化结果表明为：接种量2.14％，250mL三角瓶装液量为35mL，发酵温度31℃，培养时间20h，产酶水平达到1288 U／mL。对FZ62菌株耐热蛋白酶的代谢过程进行初步研究，酶生成与菌体生长为耦联过程。以Logistic方程和Luedeking-Piret方程为基础，建立该菌发酵过程中菌体生长、产物生成和基质消耗的动力学模型，求得模型参数，该动力学模型与试验结果拟和程度较好。采用盐析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析与Sephadex G-75分子筛柱层析等纯化步骤对该酶进行了纯化。纯化后，酶的比活力达802.40 U／mg，纯化了10.49倍，酶活力回收率为38.38％。利用SDS-PAGE电泳测定蛋白质分子量38.91kDa。以酪蛋白为底物，酶促反应符合米氏方程，米氏常数为K_m＝4.8g／L和V_m＝322.58U／mL。该酶最适作用温度为55℃，60℃以内酶活力相对稳定，最适作用pH 7.0，酶在pH值7～11较为稳定。研究金属离子对耐热蛋白酶酶活力的影响，在2mmol／L离子浓度下，K⁺、Mg²⁺对酶促反应有显著的激活作用，Cu²⁺、Mn²⁺、Zn²⁺有一定的抑制作用。同种离子不同浓度对该酶活力也有一定影响。甲醇、乙醇、1．2—丙二醇、异丙醇等有机溶剂对酶活力的抑制作用是随其浓度的升高而增大。