【目的】试图利用基于双光子激发荧光联合二次谐波产生的非线性光谱成像技术对兔耳软骨创伤愈合过程进行动态监测。探索一种在临床上能够对软骨创伤愈合监测、软骨相关疾病诊断的一种新方法。【方法】建立兔耳软骨创伤愈合模型，于三个时间点即创伤后1周、4周、20周切取少许创伤边缘修复组织及对侧健康耳软骨标本做切片行非线性光谱成像观察及HE染色观察。重点观察修复组织基本形态变化、胶原含量变化、胶原方向改变、软骨陷窝大小变化。【结果】1、非线性光谱成像技术成功实现了对耳软骨组织进行高分辨的成像，并且其所成图像与传统的组织切片HE染色图像相吻合。2、本技术还成功监测到软骨创伤愈合过程中胶原含量的变化、胶原方向的变化、软骨陷窝大小的变化。【结论】1、非线性光谱成像技术能够对耳软骨组织进行良好的成像，并且对其中部分成分如胶原蛋白等进行相对定量检测。2、软骨组织可以再生，但是新生软骨组织在形态结构及基质成分含量上均有一定差异。3、本技术在临床上是一种充满希望的能够对软骨创伤愈合监测，软骨相关疾病诊断的一种新方法。