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近几年，细胞角蛋白重新成为人们研究的热点，它与细胞生命活动和生物行为改变的关系日益受到关注，这一细胞骨架成分在肿瘤的诊断、疗效监测中应用越来越广。本论文研究了其单克隆抗体的制备，建立了针对这一细胞成分的免疫分析方法，并将其初步应用于临床诊断。 提取纯化人结肠癌细胞株HT—29细胞角蛋白成分(命名为TP21)，以此为免疫原，经过细胞融合、亚克隆筛选和ProteinG亲和层析纯化最终得到四株单克隆抗体：1—6、H13、H16、CY19。四株抗体纯度大于95％(SDSPAGE)：1—6、H13、H16为IgG1，CY19为IgG2a：H16、CY19对TP21的亲和常数分别为1.21×10~8L／mol和1.36×10~8L／mol，H13与1—6的亲和常数亦在10~7L／mol数量级：免疫组化中，1—6特异性识别肌源性组织，H13、H16、CY19识别上皮组织抗原，H16与CY19表现出相似的免疫组化染色特征。 使用棋盘实验筛选出能够形成双位点夹心的一对抗体，探讨两者形成免疫分析方法的具体条件，如反应介质，反应方式、反应温度和时间等，建立免疫放射分析(IRMA)与免疫化学发光量度分析(ICMA)方法，并将前者应用于肺癌的诊断。实验结果表明，所建立的IRMA、ICMA剂量反应曲线良好，灵敏度分别为1.2ng／ml和0.045ng／ml：工作范围分别为3.6ng／m1-1000ng／ml和0.12ng／ml-1200ng／ml；平均回收率分别为103.7％和98.8％：IRMA的批内和批间变异分别为4.99％、9.8％；ICMA的批内、批间变异分别为5.0％、7.9％；使用IRMA测定了80例正常人和150例肺癌患者，其平均值分别为9.05±6.014ng／ml、33.81±22.004ng／ml；如以21ng／ml为阳性界值，则对肺癌(n=150)、肺鳞癌(n=62)、肺腺癌(n=76)、小细胞肺癌(n=12)的检测灵敏度分别为：62.7％、59.7％、68.4％、41.7％，特异性为96.3％：ICMA与IRMA相关性良好(r=0.9891)。 研究结果表明：ICMA有IRMA无法比拟的优点，具有良好的应用前景，建立的针对细胞角蛋白的免疫分析方法在肺癌诊断中有重要的应用价值。