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乳腺癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤。乳腺细胞发生突变后很容易脱落游离,随血液或淋巴液等播散全身,形成远端转移,给乳腺癌的临床治愈增加了很大困难,目前对于转移后的乳腺癌还没有非常有效的治疗手段。SATB1蛋白是乳腺癌细胞获得转移性所必需的,SATB1增量调节可能是肿瘤细胞转移必须基因簇的开关,期望通过抑制SATB1的表达,可作为针对乳腺癌的基因治疗候选药物。本研究首先通过细胞实验验证了本实验室设计构建的三对特异性siRNA对靶标蛋白SABT1的抑制效果,然后以腺相关病毒载体系统AAV Helper-free系统为基础,拟构建分别含有抑制satb1基因和vegf基因表达的两个siRNA表达单位的重组腺相关病毒载体pAAV-VESR,包装出含有siRNA编码序列的重组腺相关病毒rAAV-VESR,并通过Real Time-PCR方法检测重组病毒介导的外源基因在MDA-MB-231细胞里的表达,及其对靶标基因的抑制效果。Real Time-PCR和Western Blot实验结果显示设计的特异性siRNA对靶标基因表达有明显的抑制效果,最高沉默率达到(64.5±1.5)%。重组腺相关病毒载体pAAV-VESR构建成功,并包装出含有目标基因的重组腺相关病毒rAAV-VESR;将重组病毒颗粒感染MDA-MB-231乳腺癌细胞系,提取RNA进行Real Time-PCR实验,结果显示克隆在病毒载体的两个siRNA分别对两个靶标具有明显的抑制效果。本研究为今后利用腺相关病毒载体进行SATB1-siRNA及各种siRNA相关的体内体外研究并开发抗肿瘤基因治疗药物提供了实验基础。