阻断B7-H1/PD-1途径增强顺铂化疗效果的实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanghuayejuan
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[目的]:探讨抗PD-1抗体阻断B7-H1/PD-1 途径联合顺铂的抗肿瘤效应以及抗肿瘤免疫力的影响。[方法]:(1)、建立TC-1肿瘤细胞C57BL/6小鼠模型,分为4组(n=4):对照组、顺铂组、PD-1抗体组、PD-1抗体联合顺铂组。空白对照组应用PBS处理,剂量100μl/只,每3天一次,用药2次;顺铂组应用顺铂处理,剂量为5mg/kg,每3天一次,用药2次;PD-1抗体组应用PD-1抗体处理,剂量为100ul/只,每3天一次,用药3次;PD-1抗体联合顺铂组联合应用顺铂与PD-1抗体,处理方式为5mg/kg顺铂溶于100ul的PD-1抗体,顺铂、PD-1抗体用药次数、剂量同上,用药方式为腹腔注射。(2)、实验期间每间隔2天测量肿瘤大小一次,绘制肿瘤生长曲线及小鼠生存曲线,观察药物的抗肿瘤效应。(3)、小鼠自然死亡或小鼠肿瘤直径达2 cm时,处死小鼠,取小鼠脾脏,分离小鼠脾单核淋巴细胞,用流式细胞仪检测脾单核淋巴细胞中CD4+CD25+T调节细胞(T regulate cells Treg)数量;同时取肿瘤组织,免疫组化方法检测肿瘤组织中B7-H1、CD8+T细胞的表达。[结果]:(1)、对照组、顺铂组、PD-1抗体组、PD-1抗体联合顺铂四组,与对照组比较,顺铂组、PD-1抗体组及PD-1抗体联合顺铂组均显示有显著的肿瘤抑制作用,联合用药组抗肿瘤效应最为明显(P<0.05)(2)、与对照组比较,顺铂组、PD-1抗体组及PD-1抗体联合顺铂组均可延长小鼠的生存时间,联合用药组生存时间最长(P<0.05)。(3)、小鼠脾脏内单核淋巴细胞中Treg细胞数量的比例为:对照组(87.00±6.06)%,顺铂组(71.50±4.04)%、PD-1抗体组(69.75±3.77)%、PD-1抗体联合顺铂组(52.00±4.32)%。与对照组相比,顺铂组、PD-1抗体组、PD-1抗体联合顺铂组Treg细胞显著减少,联合用药组减少最为明显(P<0.05)。(4)、小鼠肿瘤组织中B7-H1免疫组化阳性产物呈棕黄色,主要定位于肿瘤细胞的胞膜与胞质中。与对照组相比,顺铂组肿瘤组织B7-H1表达显著增加(P<0.05)、PD-1抗体组、PD-1抗体联合顺铂组B7-H1表达显著减少,联合用药组减少最为明显(P<0.05)。(5)、小鼠肿瘤组织中CD8+T细胞免疫组化阳性产物呈棕黄色,主要定位于细胞膜,与对照组相比,顺铂组CD8+T细胞减少(P>0.05)、PD-1抗体组、PD-1抗体联合顺铂组CD8+T细胞显著增加,联合用药组增加最为明显(P<0.05)。[结论]:(1)、抗PD-1抗体阻断B7-H1/PD-1通路联合顺铂能够有效抑制小鼠肿瘤的生长,延长小鼠生存时间。(2)、顺铂可增加肿瘤组织B7-H1表达,抗PD-1抗体阻断B7-H1/PD-1通路可降低肿瘤组织B7-H1表达增加。(3)、顺铂联合PD-1抗体减少脾单核淋巴细胞Treg数量、增加肿瘤组织局部CD8+T细胞数量。(4)、顺铂联合PD-1抗体阻断B7-H1/PD-1通路联合治疗可提高机体抗肿瘤免疫,发挥免疫细胞抗肿瘤效应,增强顺铂的化疗效果。
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