【目的】 鼻咽癌放疗后的存活细胞放射抗性增加，是引起鼻咽癌复发和转移的基础。Survivin是新近发现的放射抗拒相关基因。本实验探讨Survivin表达对鼻咽癌发生发展及放疗后复发的影响；观察鼻咽癌细胞的自发性凋亡及放射诱导凋亡、Survivin表达及其与放射敏感性的关系；探讨姜黄素及分次放疗联合姜黄素对放射抗拒细胞的Survivin表达及对其放射敏感性的影响，寻找以Survivin为靶点的放射增敏方法。 【方法】 采用免疫组化SP法检测31例放疗后复发鼻咽癌、30 例鼻咽非角化型鳞癌、30 例鼻咽粘膜慢性炎中 Survivin、Caspase-3的表达。对 CNE-2Z 放射后存活细胞Tr12给予单次剂量为6Gy的照射，获得再放射后存活细胞R18。对 CNE-2Z、Tr12及R18细胞采用MTT法绘制生长曲线；平板克隆形成实验绘制细胞放射存活曲线。流式细胞术、Hoechst33342/PI双荧光活染法检测CNE-2Z和R18的自发性凋亡及放射诱导凋亡的情况；RT-PCR 检测不同时间点和不同剂量射线处理后的CNE-2Z和R18的survivin mRNA 的表达；比色法检测Caspase-3活性。免疫细胞化学检测不同浓度姜黄素对Tr12细胞Survivin表达的影响，平板克隆形成实验检测低浓度姜黄素对Tr12细胞的放射增敏作用。对低浓度姜黄素与分次放疗处理过的R18细胞，用RT-PCR检测survivin mRNA的表达；比色法检测其Caspase-3 活性。 【结果】 (1)Survivin、Caspase-3 表达的阳性率，鼻咽粘膜慢性炎分别为23.33％(7/30)和96.67％(29/30)，在鼻咽非角化型鳞癌中分别为73.33％(22/30)和16.67％(5/30)，在放疗后复发鼻咽癌分别为83.87％(26/31)，22.58％(7/31)，两者在三组中的表达，差异有统计学意义(P<0.001)，在鼻咽非角化型鳞癌组与放疗后复发组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在放疗后复发鼻咽癌中，Survivin与Caspase-3的表达有显著负相关性(r=0.398，P<0.05)。 (2)在实验室获得可稳定传代的R18细胞，与母系CNE-2Z细胞相比，克隆形成能力下降，生长速度减慢。 (3)R18细胞与母系CNE-2Z相比，自发凋亡水平无明显差异，6Gy 射线作用后，在6h时间点可检测到亚二倍体峰，随时间延长凋亡率下降。同一剂量不同时间点及不同剂量同一时间点检测，R18细胞的凋亡水平均低于CNE-2Z。 (4)R18细胞的survivin mRNA 水平强于 CNE-2Z，放射线诱导survivinmRNA 表达水平的变化与放射剂量呈正相关，6Gy射线作用后，在6h时间点表达最低，随时间延长，表达逐渐升高。 (5)Caspase-3 活性在R18与CNE-2Z细胞之间无显著差异，R18细胞照射后Caspase-3活性短暂升高，6h、24h 与照射前相比差异有显著性。 (6)浓度在5μmol/L以上的姜黄素能使R18细胞的Survivin表达水平下降，并呈剂量依赖性。 (7)低浓度姜黄素与分次放疗结合能使R18细胞Survivin表达水平下降，Caspase-3蛋白活性增加。 【结论】 (1)Survivin参与了鼻咽癌的发生发展过程，在胞核的阳性表达可能与放射抗性相关。 (2)放射后存活细胞Tr12细胞继续经6Gy射线照射后获得可稳定传代的再放射后存活细胞R18，其放射抗性增加，可能与Survivin表达水平增高，Caspase-3蛋白活性下降，辐射诱导凋亡能力下降有关。 (3)低浓度姜黄素可提高Tr12细胞的放射敏感性。 (4)低浓度姜黄素与分次放疗结合可提高R18细胞的放射敏感性，可能与降低Survivin表达，提高 Caspase-3蛋白活性有关。