miR-194-5p对LX-2细胞增殖、迁移、活化能力的影响

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目的探讨miR-194-5p对LX-2细胞增殖、迁移、活化能力的影响以及可能的分子机制。方法1实验分为TGF-β1处理组即刺激组,TGF-β1未处理组即Ctrl组,qRT-PCR实验检测miR-29a-3p、miR-194-5p、miR-22-3p的相对表达水平。2实验分为mimics NC组,miR-194-5p mimics组,inhibitor NC组,miR-194-5p inhibitor组,经脂质体转染LX-2细胞,qRT-PCR检测miR-194-5p的相对表达水平。3 CCK-8实验和细胞集落形成实验检测miR-194-5p对LX-2细胞增殖能力的影响。4划痕实验检测miR-194-5p对LX-2细胞迁移能力的影响。5 qRT-PCR检测miR-194-5p对LX-2细胞中的α-SMA、Collagen I的mRNA相对表达水平的影响。6通过Targetscan、miRanda、miRDB三个生物信息学网络网站筛选预测miR-194-5p的侯选靶基因。7 qRT-PCR检测miR-194-5p对LX-2细胞中wnt5a mRNA相对表达水平的影响。结果1 qRT-PCR实验结果显示,与Ctrl组比较,TGF-β1刺激组miR-29a-3p、miR-194-5p、miR-22-3p的相对表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。2 qRT-PCR检测转染后的miR-194-5p相对表达水平,结果显示与mimics NC组比较,miR-194-5p mimics组的miR-194-5p的相对表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与inhibitor NC组比较,miR-194-5p inhibitor组的miR-194-5p的相对表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。3 CCK-8实验结果显示,与mimics NC组比较,miR-194-5p mimics组细胞增殖能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.01);与inhibitor NC组比较,miR-194-5p inhibitor组细胞增殖能力增强,差异具有统计学意义(P<0.01)。集落形成实验结果显示,与mimics NC组比较,miR-194-5p mimics组集落形成能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);与inhibitor NC组比较,miR-194-5p inhibitor组细胞集落形成能力增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。4划痕实验结果显示,与mimics NC组比较,miR-194-5p mimics组细胞迁移能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);与inhibitor NC组比较,miR-194-5p inhibitor组细胞迁移能力增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。5 qRT-PCR检测miR-194-5p对α-SMA、Collagen I mRNA相对表达水平的影响,实验结果显示,与mimics NC组比较,miR-194-5p mimics组的α-SMA、Collagen I mRNA相对表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01);与inhibitor NC组比较,miR-194-5p inhibitor组α-SMA、Collagen I mRNA相对表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。6结合生物信息学数据库与基因芯片共同预测到wnt5a是miR-194-5p的候选靶基因。7 qRT-PCR检测miR-194-5p对wnt5a mRNA相对表达水平的影响,实验结果显示,与mimics NC组比较,miR-194-5p mimics组的wnt5a mRNA相对表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01);与inhibitor NC组比较,miR-194-5p inhibitor组wnt5a mRNA相对表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论miR-194-5p可能通过候选靶基因wnt5a减弱LX-2细胞的增殖、迁移、活化能力。图 16 幅;表 1 个;参 116 篇。
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