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敌草快（1-1’—亚乙基—2,2’—联吡啶二溴盐;DQ）是一类非选择性、落叶型联吡啶类除草剂。其除草效果与百草枯相似,近年来,随着百草枯的停产,DQ在农业中的应用逐渐增多。与此同时,DQ中毒案例也呈逐年上升趋势。DQ中毒将成为继百草枯中毒后临床医生面临的又一艰难挑战。截止目前为止,DQ中毒机制尚未完全阐明。本研究通过建立不同程度DQ中毒大鼠模型,观察不同剂量和不同时间点大鼠肺、肝、肾组织病理变化情况,确定最佳染毒剂量。同时建立和验证了一种简便、特异的HPLC-MS方法,用于血浆和组织中DQ含量的测定。通过单次（单剂量）口服给药,研究DQ在Wistar大鼠体内的毒代动力学和组织分布情况,为以后深入研究DQ急性中毒提供实验资料。第一部分Wistar大鼠急性敌草快中毒模型的建立与评估目的:建立敌草快急性中毒大鼠模型,观察主要靶器官的病理损害。方法:将36只Wistar大鼠随机分为5个染毒剂量组（46.2 mg/kg、77 mg/kg、115.5 mg/kg、231 mg/kg和346.5mg/kg）及生理盐水对照组,每组6只,分别给予一次性灌胃染毒。记录大鼠的一般情况,采用苏木素-伊红（HE）和Masson染色法观察肺、肝、肾组织的病理变化,根据一般情况与病理变化确定最佳染毒剂量。将36只Wistar大鼠随机分为5个时间组和生理盐水对照组,每组6只,按选定最佳剂量给予一次性灌胃染毒,分别在染毒后1d、3d、7d、11d、14d处死。记录大鼠的一般情况,通过化学比色法检测血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶活力（AST）,采用苏木素-伊红（HE）和Masson染色法观察肺、肝、肾组织的病理变化。结果:与对照组相比,低剂量染毒组（46.2mg/kg和77mg/kg剂量组）无明显症状,14d存活率100%。115.5mg/kg剂量组染毒第1d出现倦怠、进食进水减少、大便不成形,染毒第3d出现眼球轻度充血、偶见眼鼻周围轻度血性分泌物,染毒第4d症状开始缓解,14d存活率为100%。高剂量染毒组（231mg/kg和346.5mg/kg剂量组）第1d出现倦怠、进食进水减少、呼吸浅快、大便不成形,染毒第2d出现眼球充血、眼鼻周围血性分泌物,呼吸深慢等症状,染毒第7d症状开始缓解,14d存活率分别为66.7%和50%。以115.5mg/kg为最佳染毒剂量,给予一次性灌胃染毒发现,大鼠染毒第1d和第3d血清AST、ALT活力高于对照组,且有统计学差异。组织病理检查发现:低剂量染毒组（46.2mg/kg和77mg/kg剂量组）染毒第14d肺、肝、肾组织病理改变不明显。高剂量染毒组（231mg/kg和346.5mg/kg剂量组）存活者14d可见正常肺组织结构大面积消失,支气管及肺泡间隔胶原纤维增生明显;肾小管多处小灶状坏死,脱落,可见红细胞及透明管型;肝细胞正常结构消失,呈空泡样变性和点状坏死。115.5mg/kg剂量组肺、肝、肾组织均在染毒1d开始出现病理反应,第3d病理变化最重,之后逐渐减轻,14d仍可见肺泡隔轻度增宽,炎性细胞浸润,局部肺泡腔变窄、萎缩,周围肺泡代偿,支气管及肺泡间隔可见胶原纤维增生;局部肾小管上皮细胞体积增大、坏死;肝中央静脉周围肝细胞空泡样变性,呈点状坏死。结论:通过一次性灌胃染毒可成功诱导急性敌草快中毒大鼠模型,115.5mg/kg为染毒剂量造模可全程观察Wistar大鼠病情变化及主要靶器官的病理损害规律。第二部分敌草快毒代动力学特征和组织分布研究目的:建立和验证一种简便、特异的HPLC-MS方法用于测定血浆和组织中敌草快的含量。方法:采用PC HILIC S5色谱柱（5μm,2.0mm×150mm）,以20mmol甲酸铵水（含0.1%甲酸）-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3ml/min。QTRAP 5500三重四级杆线性离子阱质谱仪采用电喷雾电离源（ESI）进行正离子模式检测,多反应监测（MRM）模式用于定量分析。敌草快和乙基紫精二溴化物标准品（EV）定量离子对分别为m/z183.0-m/z157.1和m/z214.0-m/z185.0。在毒代动力学研究中:取Wistar雄性大鼠30只,随机数字表法分成5组,每组每只在4个时间点于眼內眦采血。一次性灌胃给药DQ 115.5mg/kg（每100mg体重给予DQ溶液体积1ml）,分别于给药前、给药后5min、10min、25min、40min、1、2.5、5、8、10、11、12、13、16、24、34h于眼内眦取血1ml,置于肝素浸润的EP管,混匀,以14000r/min离心15min,取上清于-80℃保存待测。在组织分布研究中:Wistar雄性大鼠18只,随机分为3组。一次性灌胃给药DQ 115.5mg/kg（每100mg体重给予DQ溶液体积1ml）,分别于给药后25min、1h、24h处死6只大鼠,迅速剖取适量心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、脑、骨骼肌组织,置于EP管中于-80℃保存待测。结果:该方法的线性范围在10-1000ng/ml,最低检测限为10ng/ml。日内和日间精密度（R.S.D）均小于10.42%,准确度在96.42-111.63%之间。敌草快在血浆及组织匀浆中的回收率分别在87.4%110%和94.1%113%之间。样品稳定性实验显示,在室温、冰冻和冻融条件下敌草快在血浆及组织匀浆中稳定性良好。采用非房室模型进行药动学参数计算,结果表明:DQ达到血浆峰浓度的时间（Tmax）为0.9±0.3h,血浆峰浓度（Cmax）为5287.5±2189.5ng/ml。DQ在大鼠体内消除半衰期(t1/2)为19.3±4.3h,平均滞留时间（MRT）为4.9±0.7h,表观分布容积Vz/F为242±15.7L/kg,AUC（0-∞）为13024.5±3305.7mg/h/L。组织分布研究发现,敌草快可快速分布至各个组织,且各组织分布不一,主要分布于小肠、胃和肾脏,此外心脏、肺脏、脾脏、脑和骨骼肌中含有少量,肝脏几乎无敌草快。结论:敌草快在体内吸收较快,给药后1h血液浓度达高峰。体内分布广,主要分布于小肠、胃和肾脏,此外心脏、肺脏、脾脏、脑和骨骼肌中有少量分布。