结肠癌干细胞的筛选及其耐药性研究

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肿瘤干细胞理论的提出是近年来恶性肿瘤研究中的重大发现。目前已经从白血病、脑肿瘤、乳腺癌、肺腺癌和前列腺癌等多种肿瘤中分离出了肿瘤干细胞。肿瘤干细胞的生物学特性主要体现在具有自我更新能力、多向分化潜能、高端粒酶活性、抗凋亡活性及耐药性等方面。肿瘤干细胞理论的提出为肿瘤的发生、发展机制的研究提供了新的思路,有关肿瘤干细胞的分离及相关研究也为肿瘤治疗方法的改进带来了新的希望。本研究利用结肠癌干细胞标志物EpCAM和CD44对结肠癌细胞系Colo205和HCT-116中的结肠癌干细胞进行分选,并对其耐药性进行检测。首先,利用EpCAM和CD44做标记,采用间接免疫磁珠法从结肠癌细胞系Colo205和HCT-116中分离出表型为EpCAM~+CD44~+的结肠癌干细胞;其次,采用细胞增殖实验、诱导分化实验、软琼脂克隆形成实验和NOD/SCID小鼠体内成瘤性实验对得到的EpCAM~+CD44~+结肠癌干细胞进行鉴定;最后,采用MTT比色实验法比较EpCAM~+CD44~+结肠癌干细胞和结肠癌细胞对三种结肠癌治疗常用的化疗药物丝裂霉素、顺铂和5-氟尿嘧啶的敏感性。
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