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小球藻(Chlorella)是一种绿色微藻,并含有多种生物活性物质,具有优良的营养和功能特性,因而已成为食品和医药的重要成分。近几十年来,小球藻引起了越来越多的研究者和制药公司的兴趣。据现有资料表明,藻类物质具有一定的免疫调节和抗病原活性,但有关其对兽医病原菌的作用及发挥作用的主要物质仍鲜有报道,而这明显影响了其实践应用和经济效益。为此,本文以小球藻为研究对象,采用多种方法提取小球藻的多糖、蛋白质和脂类物质,在此基础上,再对其主要生化性质和常见病原的作用进行分析,以期为进一步了解和开发利用小球藻提供基础数据。具体如下:(1)采用五种方法破碎小球藻,再通过考马斯亮蓝法、苯酚硫酸分光光度计法、索氏提取法,分别测定蛋白质、多糖和脂类的溶出率以及上清液干重来分析小球藻最优破碎条件。结果表明,超声破碎法对小球藻破碎效果最佳,得到的蛋白质浓度为100 mg/m L多糖浓度为113.5 mg/m L,脂类重量为246 mg/m L。(2)利用正交试验优化小球藻超声破碎法,通过分析得出小球藻超声破碎法最佳的破碎条件为:功率比70%、时间90min、温度25℃。使用超声破碎法的粗提物对两种线虫(捻转血矛线虫,秀丽隐杆线虫)分别进行虫卵孵化、幼虫发育、幼虫移行实验。结果表明,小球藻粗提物对捻转血矛线虫虫卵孵化有一定的抑制作用(p<0.05),但对两种线虫幼虫的存活均具有积极作用(p<0.05),小球藻细胞裂解液对捻转血矛线虫脱壳第三期幼虫移行活力影响不显著(p>0.05)。小球藻细胞裂解液对沙门菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有抑制作用,对乳酸菌无作用,对真菌Duddingtonia flagrans有促进生长的作用。(3)采用优化后的超声破碎条件,对小球藻进行破碎,并分离上清液中粗蛋白、粗多糖和粗脂肪,测得三种粗提物的含量分别为87.26%、60.25%和72.3%。用粗多糖、粗脂肪、粗蛋白质对捻转血矛线虫和秀丽隐杆线虫进行虫卵孵化、幼虫发育和幼虫移行实验。结果表明,粗糖浓度在5mg/m L和2.5mg/m L时,多糖对捻转血矛线虫虫卵孵化有抑制作用,小球藻粗多糖、粗脂类、粗蛋白对两种线虫幼虫的存活均具有一定的积极作用。再用分离出的三种物质分别进行细菌、真菌的生物活性试验。结果表明,粗多糖对沙门菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有抑制作用,对乳酸菌无作用,对Duddingtonia flagrans真菌有促进生长的作用。粗脂类、粗蛋白质对三种细菌(沙门菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)有抑制作用,对大肠杆菌无明显作用。(4)对超声破碎后的小球藻,采用水提醇沉法得到多糖,应用层析技术分离得到CP1、CP2、CP3三种不同分子量的多糖组分,分子量分别为60255.959、26607.251和1258.925。其中CP2为小球藻多糖的主要成分(约占82%),且经过紫外连续光谱验证CP2无游离的多糖及核酸,表明纯度较高。综上所述,研究确定了小球藻最佳破碎方法,初步了解了小球藻中的部分生物活性物质,并成功提纯了小球藻多糖,为兽医病原物的防控提供了新的选择,也为进一步了解和开发利用小球藻提供了基础数据。