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目的:研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)1b基因型核心蛋白(core)对Huh7细胞Wnt/β-catenin/TCF信号通路及细胞凋亡的影响,以初步探索1b基因型HCV核心蛋白与Wnt/β-catenin/TCF信号通路及细胞凋亡的关系。方法:通过脂质体介导将重组后的真核表达载体pcDNA3.1(-)/HCV-1b-core瞬时转染Hun7细胞(pcDNA3.1(-)-C组),RT-PCR及Western Blot检测其mRNA和蛋白的表达;MTT、RT-PCR、Western Blot、双荧光素酶报告系统分别检测成功转染pcDNA3.1(-)/HCV-1b-core后Huh7细胞的增殖、β-catenin mRNA和蛋白的表达,以及TCF转录因子活性;流式细胞术和Western Blot分别检测血清饥饿诱导条件下成功转染pcDNA3.1(-)/HCV-1b-core Huh7细胞的凋亡和Caspase-3的表达;以转染空质粒的pcDNA3.1(-)组、空白对照组Huh7细胞作为对照。结果:1、重组质粒pcDNA3.1(-)/HCV-1b-core瞬时转染Huh7细胞,成功表达HCVcore相关mRNA和蛋白。2、相同条件下,取12h、24h、36h、48h、60h、72h六个时间点MTT检测发现,24h、36h、48h、60h、72h时间点pcDNA3.1(-)-C组Huh7细胞生长活力明显高于pcDNA3.1(-)组和空白对照组细胞(P<0.01),pcDNA3.1(-)组和空白对照组细胞生长活力无明显差别(P>0.05)。3、成功转染HCV core基因的pcDNA3.1(-)-C组huh7细胞β-catenin mRNA和相关蛋白相对表达量增高,与pcDNA3.1(-)组和空白对照组细胞比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。4、 pcDNA3.1(-)-C组pTOPFLASH荧光素酶相对活性明显高于本组pFOPFLASH荧光素酶相对活性,同时高于pcDNA3.1(-)组和空白对照组pTOPFLASH荧光素酶相对活性,差异有统计学意义(P<0.01);而pcDNA3.1(-)组和空白对照组pTOPFLASH和pFOPFLASH荧光素酶相对活性互相对比均无明显差别(P>0.05)。5、血清饥饿诱导凋亡后,Western Blot检测发现pcDNA3.1(-)-C组Caspase-3相对表达量明显低于pcDNA3.1(-)组和空白对照组(P<0.01)。6、血清饥饿诱导凋亡后, Annexin V-APC/PI双染流式检测发现:pcDNA3.1(-)-C组凋亡率为13.13±0.26,低于pcDNA3.1(-)组(19.90±1.14)和空白对照组(19.09±0.59),差异有统计学意义,而pcDNA3.1(-)组和空白对照组细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论:1.1b基因型HCV核心蛋白转染Huh7细胞能够促进细胞增殖。2.1b基因型HCV核心蛋白能够上调Huh7细胞中β-catenin的表达、增强TCF转录因子活性,激活了wnt/β-catenin/TCF信号通路。3.1b基因型HCV核心蛋白可以抑制血清饥饿诱导后Huh7细胞的凋亡。