【摘 要】
：
黄芩为常见的清热燥湿类中草药植物。查尔酮异构酶（Chalcone isomerase,CHI）是黄芩黄酮类生物合成途径中的一个限速酶,是黄酮类化合物生物合成路径中的关键酶,决定了植物体黄酮类化合物的产生,对CHI上调调节可使植物体合成更多活性更强的黄酮类化合物。本文通过从黄芩叶中克隆查尔酮异构酶基因（chi）,对其进行了生物信息学分析及异源表达,为查尔酮异构酶的深入研究及新型药物的研发提供重要借鉴
论文部分内容阅读
黄芩为常见的清热燥湿类中草药植物。查尔酮异构酶（Chalcone isomerase,CHI）是黄芩黄酮类生物合成途径中的一个限速酶,是黄酮类化合物生物合成路径中的关键酶,决定了植物体黄酮类化合物的产生,对CHI上调调节可使植物体合成更多活性更强的黄酮类化合物。本文通过从黄芩叶中克隆查尔酮异构酶基因（chi）,对其进行了生物信息学分析及异源表达,为查尔酮异构酶的深入研究及新型药物的研发提供重要借鉴,具体结果如下:通过从药用植物黄芩叶总RNA中RT-PCR克隆出一约650 bp的chi基因,与p MDTM19-T载体连接并转化到大肠埃希菌DH5α感受态细胞,提取重组质粒,对重组质粒进行鉴定并测序。测序结果发现该扩增基因序列长为648 bp,通过Blast比对发现其与Scutellaria baicalensis chalcone isomerase（sequence ID:KT963462.1）相似性达到100%。含有一个完整的chi的开放阅读框。其拟表达蛋白具有查尔酮异构酶催化的特有结构域,属于查尔酮异构酶家族成员。通过生物信息学分析表明其拟编码215个氨基酸,拟翻译蛋白的分子式为C1040H1632N258O321S4,等电点大约为5.09,为亲水性蛋白。该拟表达蛋白结构含有3个糖基化位点,8个磷酸化位点,无跨膜结构,二级结构和三级结构以α-螺旋为主。通过比对不同类型和种属的查尔酮异构酶亲缘关系,初步判断本文所克隆的基因拟翻译的黄芩查尔酮异构酶属于II型。并确定克隆的目的基因是查尔酮异构酶基因序列。通过构建表达载体p ET32a（+）-chi,使用不同浓度IPTG分别以37℃和16℃诱导目的基因表达,SDS-PAGE结果显示其拟表达蛋白相对分子质量约为30.0 k Da。由于不同产地、海拔不同,黄芩所产生的黄酮类化合物次生代谢物质含量也不同。查尔酮异构酶作为合成柚皮素、黄烷酮等前体物质的关键限速酶,对柚皮素、黄烷酮等的生物合成十分重要。本文通过对河北承德“热河黄芩”查尔酮异构酶基因的研究,希望能够为开发更多的生理活性物质奠定基础。
其他文献
习近平总书记指出,要把加强基层党的建设、巩固党的执政基础作为贯穿社会治理和基层建设的一条红线[1]。社区是社会的基本单位,社区治理是社会治理的重要基础,也是国家治理的重要内容。基层党建是否有效引领社区治理,直接关系到社会治理的成效。随着经济社会不断发展,城市化进程不断加快,大连市作为一个副省级城市,面临着外来人口不断涌入、老龄化增多等严峻的基层社区治理问题,2018年,大连市早于其他地区,结合地区
＜正＞报刊、广电等传统媒体在新世纪以来一直在急剧变革，通过融合战略，它们的独立形态、碎片式架构，逐渐被消解、融汇成“媒介多元体”“媒介矩阵”。无论是印刷媒体还是广电媒体，均可以集纸质媒体、声音媒体和视觉媒体于一身，可读、可听、可看，媒体融合已经基本实现了从形态到机制层面的整合。但是，融合还需要深入。深度融合是一种文化底蕴、内在逻辑的融合，其核心可以从“媒介化”入手。“媒介化”是将媒介信息转化为各种
＜正＞1前言随着物联网、大数据、云计算、人工智能等技术的不断推进,业界对数据中心的建设及运维的安全性与可靠性提出了更高的要求,其中电源系统的可靠性就是其中一项重要指标。本文选取数据中心中电源系统故障的典型案例进行剖析并给出解决办法,以期为进一步提高数据中心运维的安全性提供参考。常见数据中心灾难的分类和危害分析如表1所示,可以发现,在内部灾难中的基础设施部分,机房电源（含UPS）故障发生频度比机房起
＜正＞作为马克思主义学说的理论基础，马克思主义哲学涉及自然领域、人类社会发展、人类思维发展规律等多个方面。马克思主义哲学有着先进的世界观、方法论，正因如此，其在人类认知世界、改造世界中发挥了至关重要的引导作用。马克思主义哲学作为当代社会发展建设的宝贵财富，除去拥有先进的世界观、方法论之外，还注重推进自身原理的不断发展完善、科学应用，并从发展、实践、联系等不同视角看待问题，以及在全面客观分析基础上，
目的：观察牙髓血运重建术治疗年轻恒牙根尖周炎患者的效果。方法：选取2020年1月至2021年12月本院收治的60例年轻恒牙根尖周炎患者进行前瞻性研究，按照随机数字表法分为观察组和对照组各30例。对照组采用Vitapex根尖诱导形成术治疗，观察组采用牙髓血运重建术治疗，比较两组临床疗效，治疗前后牙冠长度与牙根长度比值（牙冠根比值）、牙根管壁厚度和龈沟液中生长因子[血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成
高中阶段的学生已经具备一定的自我意识和自主能力，教师不能再通过耳提面命的方式对其进行引导和教育。教师应将核心素养与自主管理有效融合，以此促进学生自主学习、管理和成长，有效落实“立德树人”根本任务。在实践中，教师可以引导学生通过学习管理、参与班级管理、参与校园文化建设等方式逐步提高自主管理能力。学生的自主管理能力提高后，其核心素养也会随之提升，素质教育目标也会在这个过程中得以实现。
＜正＞当今人类已经进入“乌卡时代”，面临着各种风险和不确定性的挑战。其中全球气候异常现象显著增加，带来高温、干旱、暴雨和飓风等极端天气，对各国人民的生产和生活都带来严重影响。面对极端天气带来的灾害性后果，各地城市除了加强韧性城市建设，以防御极端天气造成的问题，就是积极构建日益精密的应急管理体系，提高城市应对危机的能力。城市应急管理体系是政府自上而下地建构起来的系统工程，包含组织体系、运作机制、法律
＜正＞ 泄泻是小儿常见疾患,两岁以内之婴幼儿尤为多见。年龄愈小发病率愈高,预后也愈差。如治疗不当或治不及时,可转成慢惊,甚或气脱液竭而亡。缓则延成疳证、五迟、五软,影响发育。且泄泻之后,患儿体力更形衰弱,极易合并各种感染。故临证不可掉以轻心。对于婴幼儿泄泻的治疗,笔者认为应以调理脾胃为主。据婴幼儿之生理病理特点,尤应时刻顾护其气液之存亡,以防病情恶化。特别是重证泄泻致脱水时,从标本缓急而言,应在调
＜正＞一海兰W-36蛋鸡育雏期啄癖及防制1育雏期啄癖发生原因育雏期的啄癖主要表现为啄趾和啄尾。雏鸡脚趾受伤流血最容易引起啄趾,
查尔酮异构酶（CHI）基因是调控花青素合成的关键酶之一，在植物花色形成和黄酮物质合成中起着重要的作用。根据鸡爪槭转录组测序得到的序列设计引物，以鸡爪槭叶片cDNA为模板，通过RT-PCR方法克隆得到鸡爪槭CHI基因。结果表明鸡爪槭的ApCHI基因开放阅读框（ORF）有843 bp，编码280个氨基酸，蛋白大小为30.61 kD，等电点为8.68。用DNAMAN同源序列比对结果表明，鸡爪槭的ApCH