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【目的】:探讨survivin反义寡核苷酸（survivin antisense oligonucleotide）对胰腺癌细胞PANC-1（pancreatic cancer cells）增殖的影响。【方法】:设计并合成特异性靶向survivin的ASODN及正义寡核苷酸（SODN）,设空白对照组、空脂质体对照组、200nmol/L SODN对照组、50-800nmol/LASODN组。ASODN组ASODN经FAM标记,以阳离子脂质体（Oligofectamine）为载体转染至体外培养的胰腺癌细胞,流式细胞术计数荧光细胞百分率,以荧光细胞百分率最高者为最佳转染效率,依次筛选细胞接种数量、ASODN浓度和脂质体的量以及转染的最佳时间;转染24h后荧光显微镜观察转染后的细胞;MTT法测定细胞的抑制率;透射电镜观察细胞超微结构变化;吖叮橙（A0）与溴化乙啶（EB）染色观察PANC-1细胞凋亡的形态学改变;FCM测细胞凋亡率及细胞周期:细胞免疫组织化学技术检测survivin蛋白的表达。【结果】:1.转染液中ASODN浓度50nmol/L、100nmol/L、150nmol/L、200nmol/L、250nmol/L、400nmol/L、600nmol/L、800nmol/L时,荧光细胞百分率分别为31.9%、37.4%、41.4%、52.6%、24.2%、11.4%、16.1%、15.5%;2.接种细胞数量为2×104个/孔、2×105个/孔、2×106个/孔的荧光细胞百分率分别为12%、50.8%和11.2%;3.转染所用的脂质体量2μl、3μl、4μl时,荧光细胞百分率分别为58.8%、34.0%和23.6%;4.Survivin ASODN转染后荧光显微镜观察转染后细胞排列松散,细胞之间空隙加大,形态变圆,胞浆中颗粒较多,贴壁细胞生长较少,部分漂浮于培养液中,培养液因此变得较混浊,且随着转染浓度的增加变化更明显:5.MTT法结果显示:200noml/L的ASODN作用于胰腺癌PANC-1细胞24h、36h、48h后细胞抑制率分别为30.67%、42.67%、61.3%,随着时间延长,细胞抑制率增高,分别作用24、36、48小时后各对照组之间均无统计学差异（P＞0.05）;6.DNA凝胶电泳观察:在电泳图上呈明显的“梯状”条带,而正义组、脂质体空转染组和空白对照组则没有;7.吖叮橙（AO）与溴化乙啶（EB）染色观察PANC-1细胞凋亡的形态学改变:细胞凋亡时,细胞核或细胞质内可见致密浓染的黄绿色染色,其核染色质均高度聚集、断裂或核染色呈新月形聚集于核膜一边,核固缩与断裂,核仁消失;细胞坏死时,细胞质内黄绿色或桔黄色荧光均可减弱或消失,红色荧光增强;8.survivin ASODN处理组PANC-1细胞24h后凋亡率为38.1%,正义寡核苷酸（SODN）组为4.16%。细胞周期阻滞于G2/M期;9.采用免疫组织化学和图像分析半定量法,观察转染后各组survivin蛋白表达的平均灰度值,灰度值越大,着色越浅,表达越低。ASODN组与各对照组之间有显著差异（F=11.84,P＜0.05）。【结论】:1.survivin反义寡核苷酸转染至胰腺癌细胞最佳转染条件为:接种细胞数量为2×105个/孔,反义寡核苷酸的浓度为200nmol,脂质体的量为2ul;2.survivin ASODN能明显下调survivin蛋白的表达,抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖,并诱导凋亡。