一、几种与疾病相关的自身抗体在SLE患者血清中的表达与实验室诊断中的应用评价的研究;二、抗核小体抗体诊断SLE的价值的系统评价初探

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目的 (1)分析抗心磷脂抗体(ACA)、抗β2-糖蛋白1抗体(抗β2-GPl抗体)、抗蛋白酶3抗体(抗PR3抗体)、抗髓过氧化物酶抗体(抗MPO抗体)在狼疮性肾炎(LN)患者和类风湿性关节炎(RA)患者血清中的表达与疾病的相关性,进一步评价.ACA与抗β2-GPl抗体的相关性,探讨抗磷脂抗体(APL)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)两类自身抗体在两疾病中的表达异同及在临床诊断中的应用价值。 (2)分析抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的的表达及与疾病活动性的相关性,并与临床常规检测的抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)、抗Sm抗体、抗nRNP抗体、抗Rib-P蛋白抗体比较,评价其在SLE实验室诊断中的价值。 方法 (1)分析45例LN患者(包括活动期LN患者29例和稳定期LN患者16例),45例RA患者血清中ACA、抗β2-GPl抗体、抗PR3抗体、抗MPO抗体表达水平,采用德国欧蒙公司酶联免疫吸附法(ELISA)试剂定量检测LN患者组和RA患者组血清中ACA、抗β2-GPl抗体、抗PR3抗体、抗MPO抗体的表达。(2)分析153例SLE患者(包括活动期SLE98例,稳定期SLE55例),15例健康对照者血清中AnuA的表达水平,采用德国欧蒙公司ELISA试剂定量检测SLE患者组和健康对照组血清中AnuA的表达:全部SLE患者临床同步检测相应血清中补体C3、C4水平、其中130例SLE患者临床常规检测ANA、其中107例SLE患者临床常规检测抗dsDNA抗体、其中56例SLE患者临床常规检测抗Sm抗体、抗nRNP抗体、抗Rib-P蛋白抗体。 应用SPSSll.0统计软件,对两样本间数值的比较用非参数统计Mann-Whitney Test分析;完全随机设计的两样本率的比较用X<2>检验,配对设计的两样本率的比较用McNemar X<2>检验,非参数数据的相关分析用Spearman秩相关。 结果 (1)ACA和抗β2-GPl抗体在LN患者血清中的表达量和表达阳性率均显著高于在RA患者血清中的表达(P<0.05),ACA和抗β2-GPl抗体在LN活动组和LN稳定组中表达量比较无统计学意义(P>0.05),ACA在LN活动组中的表达阳性率显著高于在LN稳定组中的表达阳性率(P<0.05),抗β2-GPl抗体在LN活动组和LN稳定组的表达阳性率比较无统计学意义(P>0.05),在LN患者和RA患者中联合检测ACA、抗β2-GPl抗体的阳性率显著高于单独检测ACA和单独检测抗β2-GPl抗体的阳性率(P<0.05)。在LN和RA患者组中,对表达阳性的ACA数值和抗β2-GPl抗体数值进行分段描述分析显示,ACA阳性数值主要集中在低、中浓度段,抗β2-GPl抗体的阳性数值在低、中、高浓度段各段均有出现;低浓度阳性的ACA、抗β2-GPl抗体在LN患者中的表达显著高于在RA患者中的表达(P<0.05),中等浓度阳性的ACA的表达在LN患者中显著高于在RA患者中的表达(P<0.05),中等浓度阳性的抗β 2-GPl抗体的表达在LN患者中与在RA患者中比较无统计学意义(P>0.05),高浓度阳性的ACA、抗β 2-GPl抗体在LN和RA患者组中比较无统计学差异(P>0.05)。45例LN患者中的ACA和抗β 2-GPl抗体表达数值之间无明显相关性,r<,s>=0.017(P>0.05);45例RA患者中ACA和抗β 2-GPl抗体表达数值之间无明显相关性,r<,s>=-0.16(P>0.05)。抗PR3抗体在LN和RA患者组中的表达较低,两者比较无统计学意义(P>0.05);抗MPO抗体在LN和RA患者组中的表达较低,两者比较无统计学意义(P>0.05)。 (2)AnuA在SLE患者中的表达量和表达阳性率均显著高于正常对照组(P<0.05);AnuA在SLE活动期组的表达量和表达阳性率均显著高于稳定期SLE患者组(P<0.05)。SLE患者中,130例配对检测AnuA和ANA的SLE患者中,ANuA的表达阳性率低于ANA,差异有统计学意义(P<0.05);107例配对检测ANuA和抗dsDNA抗体的SLE患者中,ANuA的表达阳性率显著高于抗dsDNA抗体(P<0.05);56例配对检测ANuA和抗Sm抗体、抗nRNP抗体、抗Rib-P蛋白抗体的SLE患者中,ANuA的表达阳性率显著高于抗Sm抗体、抗nRNP/Sm抗体、抗Rib抗体(P<0.05)。153例SLE患者血清中AnuA的表达量与补体C3、C4水平相关性分析显示,ANuA与C3的相关系数r<,s>=-0.414(P=0.000);ANuA与C4的相关系数r<,s>=-0.240(P=0.003);107例SLE患者血清中抗ds-DNA抗体表达与补体C3、C4水平相关性分析显示,抗dsDNA抗体滴度与C3的相关系数r<,s>=-0.29S(P=0.002),dsDNA抗体滴度与C4无相关关系r<,s>=-0.126(P>0.05);130例SLE患者血清中ANA表达与补体C3、C4水平相关性分析显示,ANA滴度与C3的相关系数r<,s>=-0.129(P>0.05),ANA滴度与C4的相关系数r<,s>=-0.067(P>0.05);56例SLE患者血清中抗Sm抗体、抗nRNP抗体、抗rib-P蛋白抗体与补体均无相关关系(P>0.05)。 130例SLE患者AnuA表达量与ANA滴度的相关性分析显示,AnuA与ANA滴度间具有相关关系,ANuA与ANA间的相关系数r<,s>=0.295(P=0.001);107例SLE患者ANuA含量与抗dsDNA抗体滴度的相关性分析显示,ANuA与抗dsDNA抗体滴度间具有相关关系,ANuA与抗dsDNA抗体间的相关系数r<,s>=0.651(P=0.000)。 结论 1、ACA、抗β<,2>-GPl抗体在LN和RA患者血清中均有表达,与SLE免疫病理损伤的相关性更强,低、中等浓度阳性的ACA与SLE的病情活动性有相关,在LN和RA患者体内的ACA、抗β2-GPl抗体之间均无明显相关,联合检测ACA和抗β2-GPl抗体能显著提高APL在SLE中的阳性率且提高APL检测的准确性。抗PR3抗体和抗MPO抗体在LN患者与RA患者中也有较低阳性率的表达,可能与患者合并出现系统性血管炎等表现有关,其具体临床意义尚待进一步研究。 2、AnuA在SLE的实验室诊断中具有较高的敏感性,比抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗nRNP抗体、抗Rib-P蛋白抗体检测阳性率高。AnuA与SLE病情活动性相关,能作为监测SLE病情活动的较好实验室指标。抗核小体抗体与抗dsDNA抗体之间有很明显的相关性,AnuA在SLE中的表达阳性率及与补体的负相关性均比抗ds-DNA抗体高, AnuA对SLE诊断的敏感性和与疾病活动性的相关性均优于抗ds-DNA抗体。
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