霉酚酸(mycophenolic acid，MPA)是免疫抑制治疗方案的重要组成部分，广泛应用于肾、肝脏和心脏的移植后免疫抑制治疗。本研究测定MPA及体内代谢物浓度，研究肝移植患者服用麦考酚钠肠溶片(enteric-coated mycophenolate sodium，EC-MPS)后的药动学过程及转运体基因多态性对药动学影响。同时运用动物模型，研究MPA在大鼠体内的肠肝循环(entero hepatic circulation，EHC)过程，进一步为提高移植患者MPA个体化治疗水平奠定理论基础。　　本研究首先建立了LC-MS/MS法同时测定生物样本中 MPA及其代谢物7-O-葡糖苷酸MPA(7-O-glucuronide conjugate of MPA，MPAG)、酰化葡萄糖醛酸代谢物(acyl glucuronide of MPA，AcMPAG)浓度。100μl人/大鼠血浆及大鼠胆汁稀释液样本加入300μl含内标吲哚美辛的乙腈沉淀，离心后取上清液进样。采用甲酸铵水溶液-甲醇为流动相，采用梯度洗脱的方法，流速0.3 mLμmin-1。用多反应监测进行定量，电喷雾离子化源（ESI）负离子方式进行检测，定量离子对分别为 m/z319.1→274.9(MPA)、m/z495.3→174.4(MPAG与 AcMPAG)与 m/z356.1→312.0(内标吲哚美辛)。结果人/大鼠血浆中 MPA在0.10~50.5μgμmL-1，MPAG在1.13~450μgmL-1，AcMPAG在0.11~22.4μgμmL-1测定范围内线性良好(r2>0.99)；大鼠胆汁中MPA在0.02~20.2μgμmL-1，MPAG在0.12~112.5μgμmL-1，AcMPAG在0.028~22.4μgμmL-1范围内线性良好(r2>0.99)；测量准确度、精密度符合生物样品的分析要求，CV均小于15％；MPA及代谢物 MPAG、AcMPAG的提取回收率分别为73.3%~87.7%，77.3%~88.2%，72.3%~84.4%；基质效应分别为74.6%~83.5%，77.6%~85.1%，80.2%~83.6%。本研究所建立的方法专属性强、回收率高，适用于MPA及其代谢物的血药浓度监测和人体药动学研究。　　进一步研究了28例肝移植患者服用EC-MPS后不同阶段MPA及其代谢物的药动学特征。采集了全部患者服用EC-MPS后第1周和第3周0~12 h血标本，采用LC-MS/MS法测定MPA、MPAG、AcMPAG血浆中药物浓度，采用非房室法计算药动学参数。服用EC-MPS1周与3周后，28位患者MPA的Cmax、AUC0-12、t1/2分别为（18.1±8.75）与（20.7±16.0）μgμmL-1、（42.7±17.5）与（47.1±23.9）μg·h·mL-1、（3.33±2.81）与（3.30±1.89）h，其主要药动学参数在第1周与第3周差异无显著统计学意义；AcMPAG的Cmax、AUC0-12、t1/2分别为（2.50±1.86）与(1.78±1.72)μg·mL-1、(14.5±11.7)与(6.97±6.57)μg·h·mL-1、(4.48±2.53)与(3.76±1.89) h，给药后第1周AcMPAG的AUC0-12显著高于第3周(P<0.01)；MPAG的Cmax、AUC0-12、t1/2分别为(171.6±135.4)与(152.2±115.9)μg·mL-1、(1299±1204)与(1051±561)μg·h·mL-1、(8.73±4.25)与(7.75±2.87) h，MPAG的主要药动学参数在第1周与第3周差异无显著统计学意义。服用吗替麦考酚酯（MMF）与EC-MPS患者的MPA的Cmax、Tmax、t1/2存在显著差异(P<0.05)；治疗3周后代谢物MPAG的Cmax、AUC0-12显著高于服用MMF的患者(P<0.05)。结果证明不同阶段MPA蓄积不明显，与服用MMF的患者相比，EC-MPS吸收延缓，而服用不同制剂患者MPA的体内暴露差异并无显著统计学意义。　　在此基础上，我们采用SnapShot法分析28位肝移植受体与其中14位的供体的SLCO1B1、SLCO1B3、ABCB1、ABCC2等转运体基因多态性，并分析不同转运体基因型对MPA及其代谢物药动学参数的影响。发现供体SLCO1B1的A388G与SLCO1B3的G669A不同基因型患者，MPA的AUC0-12(P=0.025与P=0.045)、AUC0-∞（P=0.093与P=0.055)、AUC6-12(P=0.025)存在差异；供体ABCC2-24CC基因型AUC0-12、AUC0-∞∞、AUC6-12与CT型也有差异(P值分别为0099、0.067与0.079)。而肝移植受体的ABCB1基因型也对MPA体内过程存在一定影响，ABCB13435TT型患者的AUC0-12、AUC0-∞高于CC、CT型患者(P=0.088和P=0.079)。另一方面，转运体基因型对 MPAG的体内暴露也存在显著影响，14位肝移植供体不同SLCO1B1 T521C与SLCO1B3 T344G患者的AUC0-12、Cmax有显著差异(P<0.05)。转运体基因多态性可以部分解释移植患者给予EC-MPS后个体差异。　　随后，我们利用动物模型研究MPA在体内的EHC过程。大鼠分为三组：第一组经颈静脉给予MPA聚乙二醇400溶液20mgμkg-1，尾静脉取血并测定给药前与给药后0-12hMPA与代谢物血药浓度；第二组给药后大鼠采用胆管插管收集胆汁，测定给药后不同时段的胆汁MPA排出量；第三组大鼠进一步分为胆汁供体组和受体组，分离胆汁供体组大鼠胆管并将其胆汁引流入受体组大鼠，分别测定供体大鼠给予MPA后两组大鼠MPA及代谢物血浓度。经检测，大鼠静脉注射给予MPA后的体内药动学过程符合二房室一级吸收模型，单次给药后MPA的AUC为(43.3±20.4)μg·h·mL-1。MPA进入大鼠体内后，约8h后以MPAG的形式进行肠肝循环后出现第二吸收峰。静脉注射MPA后原型药物在4-6h内胆汁中排出量最多，为0.120±0.165 mg，累积胆汁排泄0.603±0.421 mg（约为给药量的10%）。EHC模型显示，胆汁供体组大鼠和胆汁受体组大鼠AUC分别是（42.3±27.1）和（4.28±3.05）μg·h·mL-1，估算约10%的MPA重新进入循环。大鼠模型发现10%的MPA以MPAG形式从胆汁排入肠道，并几乎完全以MPA形式重吸收，吸收峰出现于给药后8h。