目的：　　研究早期胚胎停育(early embryo death, EED)患者的中医体质特征，找出早期胚胎停育患者的易感体质，以此为依据给予调摄建议。研究早期胚胎停育患者绒毛染色体微阵列分析，探讨导致EED的胎儿染色体因素；应用蛋白组学方法，研究胚胎/胎儿16三体综合征早期胚胎停育的可能发病机制及与胚胎/胎儿正常染色体早期胚胎停育的发病机制的异同点。　　方法：　　从2015年10月至2016年6月于武警后勤学院附属医院妇产科就诊，诊断为EED后要求行人工流产术及胎儿绒毛染色体微阵列分析患者共110例，剔除10例提取DNA失败患者，最后选取100例为早期胚胎停育组，同期纳入100例因计划外怀孕要求行人工流产患者为正常妊娠人工流产组，进行中医体质分型问卷调查，根据中医体质判定标准分析EED患者中医体质分型特点及易感体质。选取6例正常妊娠人工流产和100例EED为研究对象，提取绒毛组织DNA，采用Affymetrix Cytoscan Optima芯片进行绒毛染色体微阵列分析。再根据染色体微阵列分析结果从100例EED患者中选取10例胚胎/胎儿正常染色体EED患者、5例胚胎/胎儿16三体综合征EED患者分别为正常染色体组，16三体组，再从6例正常妊娠人工流产患者中选取5例胚胎/胎儿正常染色体为对照组，应用蛋白组学方法，TMT（tandem mass tag，TMT）标记结合高效液相色谱-串联质谱（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，HPLC-MS/MS）检测3组绒毛组织蛋白质谱，应用 Maxquant软件、Uniprot人类参考蛋白质数据库分析质谱数据，应用Gene Ontology、KEGG pathway分析差异蛋白相关的生物信息过程，找出可能与16三体综合征EED和正常染色体EED相关的差异蛋白及发病机制，并用蛋白免疫印迹法（Western Blot）、免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）及免疫荧光（Immunofluorescence，IF）方法进行验证。　　结果：　　1、EED患者最常见的体质是气郁体质、血瘀体质、阳虚体质，且与正常妊娠人工流产患者比较，三种体质P值均＜0.05，差异具有统计学意义。按流产次数分组，流产1次组与流产≥2次组的阳虚体质与非阳虚体质比较，差异具有统计意义（P＜0.05）。　　2、100例EED患者共103份绒毛组织，染色体正常绒毛组织有55份，占53.4%，染色体异常绒毛组织48份，占46.6%。其中单纯染色体数目异常44份，占染色体异常92%；单纯染色体结构异常3份，占6%；染色体数目结构复合型异常1份，占2%。在胚胎/胎儿染色体异常中，16-三体综合征最多有11份，占22.9%。6例正常妊娠人工流产患者胚胎/胎儿染色体正常者有5例，染色体异常者1例，且为16三体综合征。　　3、100例EED患者103份绒毛组织按年龄分2组，20岁～＜35岁EED组共有80份绒毛组织，其中绒毛染色体正常47份，占58.8%，染色体异常33份，占41.2%；35岁～43岁EED组共有23份绒毛组织，其中胚胎/胎儿染色体正常8份，占34.8%，染色体异常15份，占65.2%。两组比较P＜0.05，差异有统计学意义。　　4、100例EED患者103份绒毛组织按自然流产次数分组：流产1次为偶发胎停育组共有绒毛组织46份，其胚胎/胎儿染色体正常25份，占54.3%，染色体异常21份，占45.7%；流产次数≥2次为复发性流产组共有绒毛组织56份，其胚胎/胎儿染色体正常30份，占52.6%，染色体异常27份，占47.4%。两组比较P＞0.05，差异无统计学意义。　　5、蛋白组学分析共鉴定3950个蛋白，定量3879个蛋白。正常常染色体组与对照组比较共有220个差异蛋白，162个蛋白上调，58个蛋白下调；16三体组与对照组比较共有337个差异蛋白，125个蛋白上调，212个蛋白下调。　　6、正常染色体220个差异蛋白主要参与血管生成、凝血、囊泡转运、胶原代谢过程、炎症反应、免疫反应、内皮细胞迁移、活性氧代谢过程等生物过程；16三体组337个差异蛋白主要参与染色体组成、核糖体生物起源、免疫反应、凝血功能的负调节、小GTPase介导的信号转导、过氧化物代谢过程、病毒与宿主相互作用等生物过程。　　7、16三体组差异蛋白位于16号染色体的有14个，正常染色体组差异蛋白位于16号染色体的一共有8个，其中有5个差异蛋白：ARMC5、HP、MT1H、PSMB10、RSL1D1是两组共有的，且表达的趋势一致。　　8、与EED母胎界面 NK细胞杀伤作用相关的差异蛋白及其他蛋白有：HLA-C,HLA-G,IL-18,CD-16,与过氧化物代谢活性氧代谢失调相关的差异蛋白及其他蛋白有：TGF-β1,CYBA,NCF2,MAP3K4,MMP2,MMP9。Western blot、IHC及IF验证结果提示：16三体组与对照组比较HLA-C,CD-16,IL-18,TGF-β1,CYBA,NCF2,MAP3K4,MMP2,MMP9蛋白表达显著升高，HLA-G蛋白表达显著降低。正常染色体组与对照组比较HLA-C,CD-16,IL-18,TGF-β1,NCF2,MAP3K4,MMP2,MMP9蛋白表达显著升高，HLA-G,CYBA蛋白表达显著降低。　　结论：　　1.气郁体质、血瘀体质、阳虚体质是EED患者的易感体质，且阳虚体质易感性可能随患者流产次数增多而增加。　　2.胚胎/胎儿染色体异常是发生EED的最主要原因，其中16三体的发生率最高，占22.9%。且年龄≥35岁EED患者胚胎/胎儿染色体异常发生率高于年龄＜35岁。　　3.16三体EED的发生与HLA-C,HLA-G,IL-18,CD-16参与母胎界面NK细胞杀伤作用有关，还与TGF-β1, CYBA,NCF2,MAP3K4,MMP2,MMP9参与活性氧(reactive oxygen species，ROS)代谢失调从而介导滋养细胞凋亡，滋养细胞的侵袭过度有关。　　4.正常染色体EED的发生也与HLA-C,HLA-G,IL-18,CD-16参与母胎界面NK细胞杀伤作用有关，但NK细胞毒性作用较16三体EED母胎界面NK细胞弱。